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第一部分:构建药物过量性头痛模型大鼠 研究背景及目的: 药物过量性头痛(MOH)是一类发生在原有慢性头痛的基础上以原发头痛加重或出现新的头痛形式并伴有长期过度止痛药物服用史为特征的慢性原发性头痛，在普通人群中的发病率为1％-2％。MOH可引起患者的生活质量下降甚至严重的失能，并给个人和社会造成严重的经济负担。虽然已明确MOH由止痛药物的过度使用引起，但目前有关MOH的发病机制尚不清楚。本研究拟“整合”炎症刺激诱发的慢性头痛动物模型和过量的止痛药物应用以建立更贴合临床实际的MOH动物模型，并通过测定头痛相关脑区的Fos表达以判断所建模型的有效性，从而为MOH发病机制的进一步探讨提供模型基础。 研究方法: 雄性SD大鼠32只随机分为4组:IS+RIZ（炎症汤+利扎曲坦）组、IS+NS（炎症汤+生理盐水）组、NS+RIZ（生理盐水+利扎曲坦）组和NS+NS（生理盐水+生理盐水）组。IS+RIZ组和IS+NS组给予硬脑膜“炎症汤”刺激，另外两组给予假刺激（生理盐水）;IS+RIZ组和NS+RIZ组给予皮下注射过量苯甲酸利扎曲普坦，另两组皮下注射生理盐水。三周后灌注固定取脑免疫组化染色法测定各脑区Fos表达情况。 研究结果: 1、三叉神经脊束核尾部(TNC)区，IS+RIZ组Fos阳性细胞数多于NS+NS组((P＜0.05)， IS+NS组较NS+NS组、NS+RIZ组Fos阳性细胞数均表达增加(P＜0.05)。 2、在延髓头端腹内侧区(RVM)和中脑导水管周围灰质(PAG)区，IS+RIZ组和IS+NS组Fos阳性细胞数均多于NS+NS组和NS+RIZ组(P＜0.05)。 3、前额叶(FL)，IS+RIZ组表达高于NS+NS组，IS+NS组较NS+RIZ组、NS+NS相比均有表达增加(P＜0.05)。 4、在所有检测脑区，NS+RIZ组Fos表达与NS+NS组无差异(P＞0.05)。 结论: IS+RIZ组大鼠出现TNC区Fos高表达说明其有头痛传导通路的激活，提示建模成功。NS+RIZ组并无TNC区Fos高表达，说明单纯药物并不会导致头痛，MOH需要在头痛的基础上发生。RVM、PAG及FL等头痛调节相关脑区的变化提示MOH可能是疼痛调节系统的异常所致。 第二部分:药物过量模型大鼠的5-羟色胺及5-羟色胺2A受体变化情况 研究背景及目的: 5-羟色胺(5-HT)是疼痛调节的重要介质之一，临床上发现长期使用止痛药物的慢性头痛患者及MOH患者表现有血小板5-HT含量下降和5-HT2A受体(5-HT2AR)密度增高的现象。本研究拟在成功建立MOH大鼠模型后，通过测定模型大鼠外周及中枢的5-HT变化情况及中枢5-HT2AR表达情况探索5-HT系统变化是否为MOH的发病机制之一。 研究方法: 在成功建立MOH大鼠模型后，运用高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)检测大鼠血小板5-HT含量，免疫组织化学染色方法确定大鼠脑内5-HT能神经元及5-HT2A受体表达情况，蛋白免疫印迹(western blot，WB)方法对大鼠脑内5-HT2A受体表达进行半定量测定。 研究结果: 1、HPLC-FLD结果提示IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组血小板5-HT水平均低于NS+NS组，且NS+RIZ组血小板5-HT水平低于IS+NS组(P＜0.05)。 2、免疫组化染色5-HT能神经元表达:TNC区，IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组阳性表达均低于NS+NS组;RVM区，IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组阳性表达均低于NS+NS组;中缝背核(DR)区，IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组阳性表达均低于NS+NS组(P＜0.05)。 3、免疫组化染色5-HT2AR表达:TNC区，IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组阳性表达均高于NS+NS组; PAG区，IS+RIZ组、IS+NS组及NS+RIZ组阳性表达均高于NS+NS组;FL区，IS+RIZ组和IS+NS组阳性表达均高于NS+NS组。(P＜0.05) 4、WB法5-HT2AR表达:皮层5-HT2AR与内参蛋白平均灰度值比值大小顺序为IS+RIZ组＞NS+RIZ组＞NS+NS组＞IS+NS组，各组之间无显著性差异(P＞0.05);脑干5-HT2AR与内参蛋白平均灰度值比值大小顺序为IS+RIZ组＞NS+NS组＞NS+RIZ组＞IS+NS组，各组之间无显著性差异(P＞0.05)。 5、相关性分析提示:在各脑区5-HT2AR阳性细胞数均与5-HT阳性细胞数呈负相关(P＜0.05);在FL、TNC区5-HT2AR阳性细胞数与Fos阳性细胞数呈正相关(P＜0.05)，在PAG区5-HT2AR阳性细胞数与Fos阳性细胞数无明显相关性(P＞0.05)。 结论: 慢性头痛、单纯药物及药物过量性头痛均可能存在外周及中枢5-HT消耗以及5-HT2A受体上调的现象。5-HT耗竭及5-HT2A受体上调可引起疼痛调节系统的变化并最终导致“中枢敏化”，这可能是MOH发生发展的重要机制之一。