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铜是人类和动物必需微量元素之一，主要分布于肌肉和骨骼内，其余分布在肝脏和血液中。大部分以有机复合物形式存在，很多是金属蛋白，以酶的形式起着功能作用，含铜的酶包括超氧化物歧化酶、单胺氧化酶、赖氨酸氧化酶、多巴胺β-羟化酶等，当缺乏铜时酶就丧失活性；同时，铜也通过含铜酶参与造血机能、维持神经系统的生理功能、结缔组织的代谢功能以及抗脂过氧化稳定生物膜等效应。值得一提的是，含铜的酶能在体内把氧和氢直接转化为水，这是铜作为体内催化剂的所特有的功能。
近几年来，高铜饲料作为促生长剂已经在畜牧业得到了广泛的应用，同时一些新型的铜源也不断涌现，但目前人们对高铜提高饲料转化率的机理并不十分清楚。
本课题拟通过体外实验探讨铜离子对体内多种代谢酶和转化酶的影响，从细胞水平研究铜对淋巴细胞的作用，并进一步从基因水平探讨铜引起淋巴细胞死亡和凋亡的机制。
本课题选氯化铜(CuCl2)作为实验铜源，以体外培养的鸡淋巴细胞为试验对象，在培养液中加入铜离子终浓度分别为0μmol/L、3μmol/mL、5μmol/L、8μmol/L、10μ mol/L、15μ mol/L、18μmol/L、20μmol/L、25μmol/L、30μmol/L、40μmol/L、50μmol/L；选用氯化钠(NaC1)为阴性对照组，其在细胞培养液中的终浓度为：100μmol/L；氯化汞(HgC12)为阳性对照组，其在细胞培养液中的终浓度为：2.5μmol/L。检测铜对鸡脾脏淋巴细胞活性、转化酶水平、细胞凋亡、抗氧化功能、DNA损伤及细胞内bcl-2、p53mRNA表达水平的影响。
1、应用台盼蓝排斥实验和MTT比色法首次测定了铜对鸡脾脏淋巴细胞的半数抑制浓度(IC50)，即：24hIC50为17.09±0.63μmol/L，48hIC50为12.27±0.43μmol/L，72hIC50为9.78±0.64μmol/L，表明禽类免疫细胞对铜高度敏感，并且随着时间的延长，敏感性升高。
2、应用流式细胞仪采用Heoches 33342/PI双荧光染色法分别检测了铜致鸡外周血淋巴细胞凋亡情况，从生化改变和形态学角度均证实铜能够引发鸡外周血淋巴细胞凋亡，表明铜能够通过诱导禽类免疫细胞凋亡发挥免疫毒性作用。
3、通过对鸡外周血淋巴细胞内谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、超氧化物酶岐化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、钙离子(Ca2+)活性的检测，发现铜能够引发鸡外周血淋巴细胞内氧化胁迫，导致细胞发生凋亡，进而发挥其对禽类免疫细胞的毒性作用。 4.首次应用碱性SCGE、DNA片段化定量分析及DNA Ladder分析等方法测了铜对鸡外周血淋巴细胞DNA的损伤效应，结果表明铜能够引发淋巴细胞DNA损伤，并呈现时间效应，此结果揭示铜对细胞DNA的损伤效应是铜免疫毒性的重要机制之一，同时也是引发细胞凋亡的重要因素。
5.成功的摸索了检测鸡外周血淋巴细胞内bcl-2、p53 mRNA表达水平的半定量RT-PCR的条件，并首次应用此法检测了铜对细胞内bcl-2、p53 mRNA表达水平的影响，推测铜可能会干扰禽类免疫细胞内bcl-2、p53 mRNA的表达，对此还需要进一步研究。