止咳定喘贴干预支气管哮喘大鼠免疫调节因子的机制研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shancjb
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目的:通过止咳定喘贴治疗哮喘模型大鼠,证实止咳定喘贴治疗有效性为穴位贴敷治疗支气管哮喘的选穴用药提供分子生物学依据。方法:购置SPF级健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为4组:正常组、模型组、假穴位贴敷组、穴位贴敷组,各15只,除正常组外各组均建立大鼠哮喘模型。根据实验流程对各组大鼠分别施以干预治疗,治疗结束后处死并进行采集标本。1、对大鼠肺组织进行HE染色,观察比较各组大鼠肺组织炎性细胞浸润情况、支气管上皮组织细胞脱落程度、气道水肿增生及闭塞程度等,确定止咳定喘贴对哮喘大鼠生理病理症状的改善情况。2、采用免疫吸附(ELISA)法检测血清IgE、肺组织中IL-10、IL-17的表达量情况,判断止咳定喘贴对哮喘模型大鼠的干预作用。结果:1.造模成功断定:与正常大鼠比对发现,哮喘模型大鼠在行为学症状及病理表现上有明显改变,出现哮喘发作等异常症状,证实造模成功。2.肺组织HE染色:正常组:支气管上皮组织细胞形态完整,肺泡形态正常,未出现水肿、增生及炎性浸润现象。模型组、假穴贴组、穴贴组组织细胞形态发生不同程度改变,有不同程度炎性细胞侵润,支气管狭窄性改变,黏膜组织异常表现。3.IgE表达量测定结果:模型组大鼠血清IgE表达量显著高于正常组,存在显著性差异(P<0.01);假穴贴组、穴贴组大鼠IgE表达量均低于哮喘模型组,存在显著差异(P<0.01);穴贴组IgE表达量低于假穴贴组(P<0.01)。4.IL-10表达量测定结果:模型组大鼠肺组织IL-10表达量低于正常组,有显著性差异(P<0.01),假穴贴组和穴贴组IL-10表达量高于哮喘模型组(P<0.01),穴贴组IL-10表达量高于假穴位贴敷组,有显著性差异(P<0.01)。5.IL-17表达量测定结果:模型组肺组织IL-17表达量显著高于正常组,有显著性差异(P<0.01);相对于模型组,假穴贴组、穴贴组大鼠肺组织内IL-17表达量降低,有显著差异(P<0.01);穴贴组IL-17表达量低于假穴贴组,有显著性差异(P<0.01)。结论:1.将假穴贴组、穴贴组与模型组大鼠行为学表现相对比,再通过HE染色情况、线管基因检测结果对照显示,支气管哮喘大鼠造模成功。2.模型大鼠血清内IgE表达量显著上升,肺组织IL-10表达量显著下降、IL-17表达量显著上升,与模型大鼠行为学及形态学症状、表现具有相关性,提示IgE、IL-10、IL-17与哮喘发作密切相关。3.本实验所使用的止咳定喘贴是通过降低哮喘大鼠IgE表达量,提高肺组织中IL-10表达量,降低IL-17表达量,来缓解哮喘症状,调节免疫平衡,从而治疗哮喘。
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