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背景和目的:脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是一种高致残性疾病。中国的脊髓损伤发生率已显著增加,但其机制复杂,临床尚缺理想的早期诊断技术手段。研究表明,转位蛋白18k Da(translocator protein 18k Da,TSPO)在小胶质细胞静息时的表达很低,而在小胶质细胞被激活后高表达,TSPO很可能具备小胶质细胞的调节作用,可作为小胶质细胞显像与治疗的靶点。目前大约有40种分属于8种不同化学类型的TSPO配体已被研制并应用于临床前研究评估,其中18F-PBR06,11C-DAA1106,11C-PBR28等随着PET技术的进步已经进入临床研究。由于PET显像比较昂贵,鉴于课题组前期已经合成了靶向TSPO的分子探针99mTc-DTPA-CB86并申报了专利,本实验从脊髓损伤的动物模型着手,以期探索建立以TSPO为靶点的脊髓损伤大鼠SPECT显像新技术。方法:1.以改良的Allen’s法构建急性脊髓损伤大鼠模型,36只大鼠随机分为假手术组(单纯椎板摘除)、损伤组和治疗组,每组12只,造模后的治疗组立即予以腹腔注射甲强龙40mg·kg-1,其余两组予以等剂量的生理盐水,每天1次,连续给药7天;2.每天观察大鼠一般状态,于造模后8h、1d、3d和7d分别进行后肢运动功能的BBB评分;3.于造模后3d和7d予以示踪剂99mTc-DTPA-CB86行TSPO靶向SPECT显影研究。4.靶向TSPO分子探针99mTc-DTPA-CB86在急性脊髓损伤大鼠脊髓中的生物学分布研究5.急性脊髓损伤大鼠脊髓病理学检查分析结果:1.成功建立急性脊髓损伤大鼠模型,各组大鼠于造模后3d开始逐步恢复正常饮食,但是损伤组和治疗组饮食量和体重均较假手术组差;2.损伤组大鼠3d内的BBB评分均为0分,3d的BBB评分1.67±0.94分,7d的BBB评分5.17±2.41分,与假手术组相比具有显著差异(P<0.001),治疗组的3d BBB评分3.0±1.15分,7d BBB评分9.17±1.34分,在7d时提高较明显,与损伤组相比有统计学意义(P<0.01);3.SPECT显像图中可见假手术组的大鼠椎板摘除部分的脊髓段未见明显的放射性示踪剂聚积影;损伤组3d的大鼠,在注射99mTc-DTPA-CB86后1h,SPECT显像可见损伤部位均有放射性示踪剂浓聚,2h时损伤处显影变淡,7d时,1h的显影比3d时更清晰,2h显影同样变淡;治疗组3d和7d的大鼠,注射示踪剂99mTc-DTPA-CB86后1h和2h,损伤阶段SPECT显像可见较浅的显影。4.分子探针在急性脊髓损伤大鼠脊髓中的生物学分布显示,假手术组椎板摘除对应节段的脊髓3d时摄取显像剂637.48±33.12(ID/g),7d时为437.91±25.96(ID/g);损伤组在损伤后3d和7d大鼠损伤节段的脊髓摄取显像剂分别为1765.89±55.27(ID/g)和2015.69±78.59(ID/g),与假手术组相比均为(P<0.001);与损伤组相比,治疗组损伤节段摄取显像剂的量为1375.37±69.11(ID/g)有明显减少(P<0.05),7d时摄取量为980.22±41.88(ID/g)具有显著差异(P<0.01)。5.急性脊髓损伤大鼠脊髓病理学检查显示,HE染色可见损伤组3d时脊髓局灶性出血,神经元胞浆内空泡较多,且伴有大量炎性细胞浸润,损伤后7d损伤区域出血量有所减少,空腔周围胶质细胞增生明显,神经元数目明显减少,灰质内仍有炎细胞浸润,免疫组化测定3d和7d的PBR蛋白着色光密度值分别为0.60±0.11和0.83±0.05;与损伤组相比,假手术组的脊髓含有大量神经元,在脊髓灰质和白质中均匀分布,无明显神经元凋亡或胶质细胞增生的现象,PBR着色程度分别为0.10±0.02(P<0.001)和0.24±0.05(P<0.001);治疗组在术后3d和7d神经元保存较多,胶质细胞增生明显减少。免疫组化图像光密度分析显示,治疗组术后3d为0.45±0.09(P<0.05)和7d为0.52±0.10(P<0.05)结论:1.脊髓损伤7天内,靶向TSPO分子探针99mTc-DTPA-CB86在损伤组大鼠脊髓的SPECT显影随病程发展逐渐清晰,甲强龙治疗可以抑制或减缓SCI的病程进展。2.脊髓损伤7天内,损伤组大鼠脊髓对靶向TSPO分子探针99mTc-DTPA-CB86的摄取量随病程发展逐渐增多。3.脊髓损伤7天内,损伤组大鼠脊髓小胶质细胞随病程发展而增生明显,免疫组化亦可见PBR的表达随之增强。4.99mTc-DTPA-CB86-SPECT显影可有效进行脊髓损伤的早期评价。