硼替佐米对急性髓性白血病细胞凋亡及SALL4基因和Wnt信号通路的影响

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目的:探讨硼替佐米对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株和急性红白血病TF1细胞株的凋亡诱导作用及其对SALL4基因和Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因C-myc、CCDN1的影响。方法:MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞化学检测SALL4蛋白表达;Western Blot检测SALL4蛋白的表达情况。荧光定量PCR检测SALL4、C-myc、CCND1基因表达情况。结果:硼替佐米抑制两种细胞的增殖,呈时间和计量依赖性。NB4和TF1细胞48hIC50分为23.97nmol/L和25.36nmol/L。硼替佐米诱导两种细胞凋亡作用呈剂量依赖性。经30、50nmol/L浓度硼替佐米处理后24h后,NB4细胞的凋亡率分别为(27.75±1.77)%和(40.45±12.80)%,与对照组(4.65±3.18)%相比差异具有统计学意义(P<0.05);50nmol/L浓度硼替佐米处理后24h后,TF1细胞的凋亡率为(64.60±1.31)%,与对照组(16.15±2.90)%相比,差异具有显著性(P<0.05)。免疫细胞化学显示两种细胞均表达SALL4蛋白,定位于细胞核。Western Blot结果表明,硼替佐米能够抑制两种细胞中SALL4B蛋白的表达,具有时间剂量依赖性。硼替佐米能够显著抑制SALL4基因及C-myc、CCND1基因的表达。经50nmol/L硼替佐米作用24h后,各组细胞的基因表达与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。SALL4基因和C-myc、CCND1基因表达改变存在相关性(rs=0.857,P<0.01; rs=0.929,P<0.01)。结论:SALL4基因及Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因C-myc、CCND1的抑制在硼替佐米诱导NB4、TF1细胞凋亡的过程可能起重要作用。
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