姜黄素联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞的抑制作用及其对COX-2、NF-κB蛋白表达的影响

来源 :泸州医学院 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luckycpw
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目的:探讨姜黄素联合5-氟尿嘧啶抗肝癌细胞(SMMC-7721及Bel-7402)的增殖及其对SMMC-7721细胞COX-2、NF-κB蛋白表达的影响。  方法:用MTT比色法检测姜黄素、5-氟尿嘧啶单用及联合运用对肝癌Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;用Western Blot检测姜黄素与5-氟尿嘧啶在不同比例下作用于肝癌SMM C-7721细胞48h后COX-2、NF-κB蛋白的表达情况,数据统计采用单因素方差分析及LSD-t检验,P<0.05为有统计学意义。 结果:1、姜黄素和5-氟尿嘧啶单用对肝癌SMMC-7721及Bel-7402细胞增殖的抑制作用呈现浓度依赖性,两药单独作用于肝癌SMMC-7721细胞48h的IC50值分别为(89.06±11.85)和(21.90±1.54)μmol/L,作用于肝癌Bel-7402细胞48h的IC50值分别为(94.74±4.03)和(38.48±2.27)μmol/L;2、分析联合运用姜黄素和5-氟尿嘧啶作用于肝癌细胞株24h、48h及72h的增殖抑制作用,作用于肝癌SMMC-7721细胞24h与48h的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),24h与72h的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),48h与72h的抑制率差异无统计学意义(P>0.05),作用肝癌Bel-7402细胞24h、48h与72h的抑制率两两之间比较差异有统计学意义(P<0.05);3、根据姜黄素与5-氟尿嘧啶联合作用肝癌细胞48h后引起抑制率为50%时的浓度,计算出引起抑制率为50%时的CI值,我们得出当姜黄素和5-氟尿嘧啶的比例为1∶4时,其对肝癌SMMC-7721细胞的联合作用为拮抗,其余比例为协同作用,当姜黄素和5-氟尿嘧啶的比例为1∶2和2∶1时,对肝癌Bel-7402细胞的联合作用为拮抗,其余比例为协同作用;4、联合组与对照组、单用组比较NF-κB、COX-2蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05),联合组较对照组细胞核的NF-κB的表达增强,而细胞浆的NF-κB的表达减弱,在分析联合组之间对NF-κB蛋白的影响时,当姜黄素与5-氟尿嘧啶以高浓度和低浓度按1∶1、1∶2和2∶1的比例作用于肝癌SMMC-7721细胞48h,无论在高浓度组还是低浓度组,当姜黄素与5-氟尿嘧啶的比例为2∶1时,其细胞核NF-κB蛋白表达最强;在高浓度组,当姜黄素与5-氟尿嘧啶的比例为2∶1时,细胞浆NF-KB蛋白的表达最弱,在低浓度组,当姜黄素与5-氟尿嘧啶的比例为1∶2时,细胞浆NF-κB蛋白的表达最弱,联合组及单用组与对照组的COX-2蛋白的表达减弱,联合组与单用组相比表达减弱,联合组之间的比较,无论在高浓度组还是低浓度组,当姜黄素与5-氟尿嘧啶的比例为2∶1时,其COX-2蛋白表达最弱。  结论:1、姜黄素和5-FU具有抑制肝癌细胞增殖的作用,且呈浓度依赖性;2、姜黄素与5-氟尿嘧啶在一定的比例下呈现明显的协同作用;3、当姜黄素与5-氟尿嘧啶在最佳的比例下能明显提高5-氟尿嘧啶的抗癌作用,且最佳比例可能为2∶1;4、推测姜黄素联合5-氟尿嘧啶抑制肝癌细胞增殖的机制可能与NF-κB在细胞核内聚集及抑制COX-2的表达有关。
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