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自然环境中,一些对植物不利的因素如:干旱、高盐、极端温度等,会影响植物的营养生长和发育。这些逆境胁迫也会严重影响农作物的产量。植物在受到逆境胁迫时,会对自身的生理、生化和分子水平上的反应进行调整,使其能够存活下来。植物对环境的这种适应性决定了植物的分布情况,而这种适应性必然与植物的生长特性和内在调节机制有关。中间锦鸡儿(Caragana intermedia Kuang et H.C.Fu)主要分布于干旱半干旱的荒漠地区,耐干旱、盐碱和极端温度,具有防风固沙、保持水土等生态价值还可用于造纸以及在严寒冬季里作为羊和骆驼的重要饲草等。NAC(NAM,ATAF和CUC)转录因子是植物特有的、最大的转录因子家族之一;MYB转录因子在动物、植物中都存在,但是也是植物体内最大的转录因子家族之一。两类转录因子在植物响应各种环境胁迫过程中都起到非常重要的作用。本文从中间锦鸡儿中克隆了两个NAC转录因子和一个MYB转录因子并对其功能进行了研究,具体结果如下:1、克隆得到两个胁迫相关NAC转录因子:CiNAC3和CiNAC4。CiNAC3的c DNA全长为1644 bp,编码338个氨基酸;CiNAC4的c DNA全长为1605 bp,编码344个氨基酸。序列比对表明其包含典型的NAC结构域,与大豆的Gm NAC3和GmNAC4的一致性最高,分别达到76%和80%;与拟南芥的ANAC072的一致性最高,分别达到61%和59%。2、CiNAC3和CiNAC4的表达受到ABA及干旱、脱水、冷、热、高盐和损伤等非生物胁迫的诱导。亚细胞定位发现CiNAC3和CiNAC4定位到细胞核中,这与它们作为转录因子的功能是一致的。对ProCiNAC4:GUS转基因拟南芥进行组织化学染色分析发现,CiNAC4启动子在维管束中活性最高,且受损伤诱导。3、转CiNAC3和CiNAC4基因的拟南芥种子在萌发过程中对ABA的敏感性降低;无论是4周大苗还是幼苗阶段,转基因株系对盐胁迫的耐受性都优于野生型;并且转CiNAC4基因的株系侧根数目显著高于野生型。4、克隆得到Ci MYB177,序列比对表明其仅包含一个MYB重复,与大豆中的GmMYB177的一致性最高,与拟南芥中的RVE2的一致性最高。5、CiMYB177受多种非生物胁迫的诱导,并且表达呈节律性的昼夜变化。亚细胞定位发现Ci MYB177定位到细胞核中。Ci MYB177启动子中包含许多与光、昼夜节律及非生物胁迫相关的顺式作用元件。