水稻白叶枯病菌FtsZ的体外表达及炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对其作用研究

来源 :江西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gracexiu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
炭样小单孢菌菌株JXNU-1是一株从土壤中分离得到的放线菌,所产单一组分的广谱抗生素对常见的G+和G-均有抑制作用,但其抗菌机制尚不明确。本研究以引起水稻生产严重病害的水稻白叶枯病菌为例,研究了炭样小单孢菌JXNU-1抗生素对水稻白叶枯病菌FtsZ蛋白的作用,具体内容和结果如下:(1)以水稻白叶枯病菌总DNA为模板,采用巢式PCR方法扩增获得水稻白叶枯病菌FtsZ基因,构建FtsZ基因的表达载体pET-22b-fteZ,转化表达宿主E. coli BL21后,经PCR、Nde I/Xho I双酶切及测序鉴定、阳性克隆子经IPTG诱导表达,FtsZ蛋白经镍柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blotting分析鉴定,获得了电泳纯的FtsZ蛋白;(2)以单因素实验法优化了重组大肠杆菌表达FtsZ蛋白的条件,即在诱导的菌体浓度(以OD600表示)为0.8,IPTG浓度为1.0 mmol/L,温度为37℃,诱导时间为3h,FtsZ蛋白有最大可溶性表达;(3)利用生物信息学方法分析了水稻白叶枯病菌FtsZ蛋白的结构,结果表明,水稻白叶枯病菌FtsZ为结构稳定的亲水性蛋白,含414个氨基酸残基,C端起第15至第187个氨基酸残基决定其GTPase活性,蛋白含细菌FtsZ蛋白共有的GTP结合位点GGGTGTG,FtsZ蛋白二级结构中,螺旋结构为30.4%,折叠结构为11.8%。(4)采用酶学方法研究了FtsZ蛋白的GTPase特性,结果表明其最适温度为50℃,在温度为60℃时迅速失活,最适pH值为7.0,Mg2+存在时活性最强,其Km值为5.78 mmol/L(5)炭样小单孢菌JXNU-1抗生素可抑制水稻白叶枯病菌的生长,并导致水稻白叶枯病菌出现丝化现象,同时可明显抑制FtsZ蛋白的GTPsae活性。上述研究结果表明,炭样小单孢菌JXNU-1产抗生素的抗菌作用可通过抑制水稻白叶枯病菌的FtsZ蛋白的GTPsae活性,进而抑制细胞的分裂。
其他文献
本文以采自云南昆明滇池周围的大漂(Pistia stratiotes L.)为研究对象对其进行了系统的化学成分研究,我们采用硅胶、氧化铝、聚酰胺、大孔树脂、葡聚糖凝胶LH-20、RP-8、RP-18、Toyopearl HW-40F等柱层析方法,从大漂中分离得到了16个化合物,借助质谱(EI-MS, FAB--MS)、氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、二维核磁共振技术(HMBC,H-H
摘要:中学地理课堂教学要培养学生的创新意识和创新思维。地理教学中要重视培养学生的能力、态度和创新精神。变被动为主动,使学生的主动性和主观能动性在学习过程中充分发挥出来。  关键词:地理教学;创新意识;创新能力一、正确认识地理中的创新教育  “创新教育”是以培养人的创新精神和创新能力为基本价值取向的教育,其核心是创新能力的培养。从这个意义上理解,在地理教学中,通过对中小学生施以教育和影响,促使他们去
本文对5-氮胞苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化进行了研究。文章探讨了DNA低甲基化对诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的可行性以及分化效率的影响。建立利用5氮
建立小鼠皮肤长波紫外线(UVA)氧化损伤的动物模型和真皮成纤维细胞UVA单次氧化损伤的细胞模型,从动物整体和体外培养细胞两个层次上探讨UVA照射下玉米幼芽提取物(EMP)对小鼠皮肤氧化损伤的防护作用。动物实验设空白对照、UVA模型、EMP+UVA和VitC+UVA 4个组;透射电镜观察各组小鼠皮肤的超微结构;生化法测定小鼠皮肤组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MD
摘要:在语文教学中,教师应重视语文所具有的培养学生基本的语言能力的工具性特点,并以学生为主体,根据教材内容,在语文教学中加强对学生语文实用能力的培养,从而提高语文教学的教学效率和社会效益。  关键词:初中语文;学习能力;语文教学自主学习就是变“要我学”为“我要学”,因而学生在学习的过程中,有明确的目标追求、深厚的学习兴趣、活跃的思维和创新意识。有利于学生开动脑筋、开发智力,充分发挥学生的主体性,培
摘要:为更好的体现小学英语课程标准提出的“在用中学,在学中用”,我们一直寻求着一种最佳的教学方法——生活化教学,让英语教学与生活融为一体,用生活理念构建英语教学大课堂,把创新精神与实践能力有机结合起来,真正发挥英语的交流作用。  关键词:生活化教学;回归生活;玩中学;学中玩;创造情景;模拟生活一、小学英语生活化教学的背景  社会需求和实践使我们充分认识到语言交流的重要性,为更好的体现小学英语课程标
摘要:创新思维是一种思维模式,是指人在实践学习活动中,根据自己的目标展示出来的一种主动的、独创的、富有新颖特点的思维方式,它是在原有经验材料和学得知识的基础上进行合理性和突破性的创造性组合,形成新概念成果。《面向21实际教育振兴行动计划》在“行动计划的主要目标”中明确指出:“瞄准国家创新体系目标,从培养造就一批高水平的具有创新能力的人才”。实施创新教育是新时代教育的主旋律,是素质教育的重要任务。创
摘要:提问是教学过程中师生之间进行相互交流的方式,是引发学生产生心智活动,并作回答反映的信号刺激,是促进学生思维发展的手段和途径。在当今教学的整体结构中,学生已不是被動的纯客体,而是在教师主导作用引领下的教学活动的主体。“知道如何提问就等于知道了如何教学”。  关键词: 激发兴趣;发现问题;有效提问生本课堂首先是营造了浸润着民主、平等、激励、和谐的人文课堂环境。新课程倡导的自主学习、合作学习、探究
我国的蕨类植物资源十分丰富,约有2600多种,占全世界12000种的1/5强,其中许多种具有很高的观赏价值。在欧美的一些国家,蕨类植物已经成为花卉行业的一个重要组成部分,早已进入家庭
学位
随着全世界自然环境的恶化,干旱已对人类社会经济生活和工农业生产造成了巨大的影响及损失,对水稻生产影响尤其深重。全世界自然气候的恶性转变致使干旱发生的周期愈来愈短,程度愈来愈严重,对粮食产量构成了严重的威胁,由其导致的粮食减产,可超过其它环境胁迫所造成的减产总和。干旱已成为影响水稻生产最主要的非生物影响因子,发掘抗旱资源、研究其抗旱机理、进而培育抗旱水稻新品种是缓解这一不利影响的有效途径。东乡野生稻