【摘 要】
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目的以微管蛋白为靶点建立抗肿瘤活性物质筛选模型，并应用该模型进行靶向筛选。方法从新鲜猪脑组织中提取、纯化微管蛋白，采用SDS-PAGE对其进行鉴定，采用Bradford法进行含量分析
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目的以微管蛋白为靶点建立抗肿瘤活性物质筛选模型，并应用该模型进行靶向筛选。方法从新鲜猪脑组织中提取、纯化微管蛋白，采用SDS-PAGE对其进行鉴定，采用Bradford法进行含量分析；采用浊度法，通过检测微管蛋白溶液吸光度的变化，分析微管蛋白聚合—解聚的功能活性；采用电镜法，观察微管蛋白的超微结构变化；建立紫杉醇、秋水仙碱阳性对照，并应用该模型进行靶向筛选。结果SDS-PAGE鉴定结果显示，微管蛋白的分子量在55KD左右；含量分析结果显示，蛋白初始浓度为7.5-20mg/ml。浊度法显示微管蛋白的聚合—解聚功能活性良好，阳性对照药紫杉醇和秋水仙碱对微管蛋白的作用分别表现为促进和抑制微管蛋白聚合，与文献报道一致；筛选结果显示8个细胞毒活性物质能够干扰微管蛋白的动力学过程；电镜结果显示，8个细胞毒活性物质中的2个能促进微管蛋白聚合，2个化合物能够抑制微管蛋白聚合。结论基于微管蛋白抗肿瘤活性物质靶向筛选模型是可靠和稳定的；靶向筛选结果提示：8个活性物质能够干扰微管蛋白的动力学过程，提示微管蛋白可能是其发挥细胞毒活性的机制之一。
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