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目的对于胃癌的筛查，常用的血清学标志物通常缺乏足够的灵敏度和特异度。微小RNA（microRNA，miRNA）在肿瘤的发生和转移中起重要作用。本课题组前期研究结果表明，miRNA异常表达于胃癌组织中并可出现在胃癌患者的外周血中。然而，由于大多数肿瘤相关miRNA缺乏组织特异性，如何应用它们用于判断肿瘤的来源和类型仍然是肿瘤研究领域中的一个难题。鉴于胃液来源的组织特殊性和miRNA在胃癌发生中的重要性，在本研究中我们拟先分析胃液miRNA存在的可能性，然后建立分析胃液miRNA的方法，最后通过比较健康人、良性胃病患者和胃癌患者胃液miRNA的出现规律，为胃癌的诊断提供一种新的非创性检测方法。方法1.采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）技术和克隆测序技术证明胃液中稳定存在miRNA。2.收集141例行消化内镜检查的健康人和胃病患者胃液样本，其中包括42例胃癌患者、34例胃溃疡患者、18例萎缩性胃炎患者和47例正常人或轻度胃炎患者；同时收集10对胃癌患者活检癌组织和癌旁组织。采用RT-qPCR的方法检测胃癌组织和胃液中miRNA的水平。3.构建受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，找出最佳截断值（cut-off value）。4.分析胃液miRNA水平与胃癌患者临床病理因素的关系并与常用胃癌标志物进行比较，评估胃液miRNA作为胃癌标志物用于胃癌筛查的价值。结果1.采用RT-qPCR和测序技术证明胃液中存在miRNA，并发现胃液在室温放置12h以上时其含有的miRNA仍然可被检测出。2.胃癌活检组织中，miR-21和miR-106a的表达水平明显高于癌旁组织。然而，相对于良性胃部疾病，胃癌患者胃液中miR-21和miR-106a的水平却显著降低。3.胃液miR-21和miR-106a用于区分良、恶性胃病的ROC曲线下面积（area under theROC curve，AUC）分别达到0.969（P<0.0001）和0.871（P<0.0001），其最佳截断值（以ΔC_q表示）分别为-2.73和2.61。男性胃癌患者胃液miR-21和miR-106a水平明显低于女性患者（P=0.015）。胃癌患者胃液miR-21和miR-106a的水平与其Borrmann分型显著相关。4.对于胃癌的辅助诊断，胃液miRNA在诊断效力和阳性检出率等方面均高于目前常用胃癌血清标志物。结论通过对胃液miRNA的存在性和稳定性研究，说明了胃液miRNA具备了成为新的胃癌标志物的前提条件。经不同胃病患者胃液miRNA水平的比较分析，明确了胃液miRNA在胃癌辅助诊断中的价值，证明了胃液miRNA是一种优于传统血清学胃癌标志物的新候选胃癌标志物。