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GABAB受体是中枢神经系统主要抑制性神经递质GABA的代谢型受体,属于G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptors,GPCRs）超家族C家族,是由GABAB1亚基和GABAB2亚基组成的异源二聚体,其中GABAB1亚基负责正位配体结合,GABAB2亚基则负责偶联下游特异性G蛋白。GABAB受体在中枢神经系统中表达和分布十分广泛,其功能紊乱与许多神经和精神类疾病相关。目前,针对GABAB受体研发上市的唯一药物是其正位激动剂巴氯芬（Baclofen）,它在临床上对肌肉痉挛和酒精依赖等多种疾病表现出功效,但在生理使用过程出现镇静、肌肉松弛和体温降低等副作用。变构调节剂同GABAB受体相互作用位点在拓补结构上不同于正位位点,它们既可以协同改善正位配体引起的GABAB受体相关活性,又表现出更好的受体选择特异性,可以为药物开发和疾病治疗提供新可能。目前,针对GABAB受体特异性正向变构调节剂（Positive allosteric modulator,PAM）研究取得了较好进展,包括CGP7930、GS39783以及rac-BHFF在内的多种正向变构调节剂在体外细胞功能以及活体动物实验中都表现出很好的功能活性,某些正向变构调节剂还表现出内在激动剂效应,进一步为GABAB受体活性调控提供了新选择。但具有内在激动剂效应的变构激动剂如何单独激活GABAB受体等相关分子机制细节并不清楚。本课题以GABAB受体3种典型正向变构调节剂为基础工具,采用体外功能检测方法对这些正向变构调节剂活性特征进行了研究,进一步确认了它们同GABAB受体相互作用的部位,并采用多种功能检测方法确认了rac-BHFF的内在激动剂效应。通过三维同源建模,我们对参与影响rac-BHFF激动剂活性的潜在功能区域进行了预测,并采用定点突变功能筛选等方法对相关功能区域进行了确认。我们在GABAB2亚基的七次跨膜结构域中发现一个全新的功能区域,该功能区域可以显著影响rac-BHFF的激动剂效应,并参与了GABAB受体组成性活性的调控过程。此外我们还发现,GABAB1亚基七次跨膜结构域可以对rac-BHFF的激动剂效应产生直接影响。正向变构调节剂激动剂效应研究可以为GABAB受体激活机制及新型变构调节剂的开发等研究提供帮助。