急性心肌梗死患者血浆外泌体中microRNA的初步研究

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目的:急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)是致死率和致残率均很高的一种疾病,严重威胁了人类的健康。AMI的早期诊断及修复或再生受损的心肌细胞一直是研究的重点。心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)是目前临床上诊断AMI的“金标准”,但cTn存在一定的缺陷。此外,AMI时缺血区域心肌细胞持续缺氧最终发生坏死,恢复冠状动脉血流后的再灌注又会加重心肌细胞的损伤。因此,寻找具有高灵敏度和特异性的生物标志物以及修复或再生受损心肌细胞的方法对AMI的诊断及治疗有着重要的意义。研究发现,外泌体可通过递送miRNA发挥心脏保护作用,并且外泌体中的miRNA在AMI时发生了表达变化,有可能对AMI的发生有一定的预测价值。AMI是冠状动脉血流中断,急性、持续性的缺血缺氧最终导致局部心肌细胞发生坏死。我们选择了4种受缺血缺氧调节并参与了调控心肌细胞凋亡及坏死的miRNAs(miR-146a、miR-135a、miR-103、miR-210),通过测定AMI患者外泌体中这4种miRNAs的表达水平,分析其在AMI治疗中的潜在价值,以及是否对AMI的发生有一定的预测价值。方法:选取2018年8月至2018年12月期间于我院明确诊断为AMI的住院患者51例(男性34例,女性17例)入组AMI组;选取同时期的体检者29例(男性15例,女性14例)入组对照组。利用exoRNeasy kit试剂盒分别提取两组血浆外泌体内总RNA,并通过实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)分别检测AMI组和对照组血浆外泌体中miR-146a、miR-135a、miR-103和miR-210的表达水平。建立受试者工作特征曲线(ROC),以评估外泌体中miR-146a、miR-135a、miR-103和miR-210对AMI患者的预测能力。结果:1.对AMI组和对照组血浆外泌体中miR-146a、miR-135a、miR-103和miR-210的表达水平进行测定。结果显示:与对照组相比,AMI组患者血浆外泌体中miR-146a(2.24±2.78比1.00±0.99;p<0.05)表达水平升高;miR-135a(20.76±22.00比1.10±0.87;p<0.01)表达水平明显升高;miR-103(15.63±20.86比1.02±0.77;p<0.01)表达水平明显升高;miR-210(30.33±28.85比1.16±0.91;p<0.01)表达水平明显升高。2.通过对miR-146a、miR-135a、miR-103和miR-210进行ROC分析,评估外泌体中miRNA对AMI患者的预测能力。结果显示:miR-146a的AUC为0.636(95%CI:0.515-0.756;p<0.05),最佳临界值为1.087,敏感性和特异性分别为58.8%和72.4%;miR-135a的AUC为0.967(95%CI:0.934-1.000;p<0.01),最佳临界值为1.958,敏感性和特异性分别为92.2%和93.1%;miR-103的AUC为0.904(95%CI:0.840-0.968;p<0.01),最佳临界值为1.396,敏感性和特异性分别为88.2%和79.3%;miR-210的AUC为0.984(95%CI:0.965-1.000;p<0.01),最佳临界值为1.683,敏感性和特异性分别为96.1%和89.7%。结论:1.AMI患者血浆外泌体中的miR-146a、miR-135a、miR-103和miR-210的表达水平较对照组升高,是AMI潜在的治疗靶点。2.血浆外泌体中的miR-135a、miR-103和miR-210可作为辅助AMI诊断的标志物。
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