近年子宫颈癌发病率明显上升及年轻化。宫颈上皮内瘤变(CIN )为癌前病变,应用三阶梯能明确病变级别。人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的基本因素,高危型HPV的持续感染将引发CIN及宫颈癌。发达国家宫颈癌防治的经验及流行病学资料证明,如果对适龄妇女(25～65岁)每隔12月进行一次有效的宫颈筛查,并对筛查出的CIN给予规范治疗,那么绝大多数妇女将能有效地防治宫颈癌。宫颈癌是妊娠期最常见的恶性肿瘤。本文目的在于探讨妊振相关时期妇女进行宫颈筛查的必要性,了解妊娠相关性CIN的患病现状,比较不同筛查办法,探讨应用FISH技术检测宫颈上皮细胞中hTERC基因扩增的临床意义,同时了解母婴间HPV垂直传播状况。目的:1.调查妊娠相关性宫颈上皮内瘤变现状,探讨宫颈筛查临床意义。2.应用荧光原位杂交技术(FISH)研究3号染色体长臂端粒酶基因(hTERC)在宫颈上皮细胞中的表达;分析比较异常在HPV感染中、异常的TCT,及病理CIN中hTERC基因异常表达的临床意义。3.应用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术检测胎盘、羊膜等样本HR-HPV分型,探讨HR-HPV母婴间垂直传播状况。方法:1.2007年11月至2009年4月我院产科门诊就诊的1912例妇女,1165例进行宫颈细胞学筛查(TCT )同时,857例接受基因杂交信号捕获检测技术Ⅱ代(HC-Ⅱ)检测HR-HPV,按照三阶梯原则进行随诊,至产后3月至1年。2.抽取上述67例宫颈脱落细胞标本,采取TCT制片法进行制片。选择细胞学正常的宫颈脱落细胞20例为对照组建立实验阈值。应用FISH技术,进行hTERC基因检测,记录细胞数量、荧光信号强度。依据细胞学结果、是否为HR-HPV感染、组织学结果进行分组,比较分析hTERCJ基因在不同组别中的异常表达。3.收集HR-HPV呈持续感染的孕妇分娩时的胎盘、羊膜、脐带、脐带血、新生儿口腔分泌物、乳汁,采用MALDI-TOF MS进行HR-HPV分型检测,了解HPV母婴垂直传播状况及探讨传播与分娩方式的相关性。结果:1.HR-HPV阳性118例,孕期14.98%、产后4.17%。TCT异常36例。正常组、ASCUS、ASC-H、LSIL及HSIL,HR-HPV检出率分别为11.20%、53.85%、75%、87.5%、83.33%。HR-HPV持续感染19例、转阴28例:平均年龄分别为30.4岁、30.0岁,病毒载量≥10 pg/m118例、病毒载量＜10 pg/ml10例,TCT异常、TCT进展在两组中分别为11例和1例、6例(均为HPV持续感染者)和0例。异常TCT好转12例、维持原状7例(6例HPV持续阳性、1例HPV阴性)。2.终止妊娠的801例中,流产率、早产率、胎膜早破率、剖宫产率分别0.74%、3.7%、24.4%、69.1%、与同时期未接受筛查的孕妇(747例)比较无统计学差异。3.hTERC基因阳性表达率:细胞学分组中正常组、异常组分别为7.7%、50%,两组比较有显著差异(P＜0.05),其中ASCUS、LSIL、HSIL组间比较有显著差异(P＜0.05);组织学分组中炎症、CIN组分别为25%、92.3%,两组比较有显著差异(P＜0.05)。4.HR-HPV检测阳性病例44例中(阳性组),hTERC基因阳性表达率25%,HR-HPV阴性病例(阴性组)10例中hTERC基因阳性表达率0%,阳性组、阴性组间比较有统计学差异(P<0.05),未检测HR-HPV 3例。5.检测持续阳性15例孕妇分娩时的胎盘、羊膜、脐带、脐带血、新生儿口腔分泌物、乳汁等样本共58例,检出6个阳性病例、8例阳性样本,包括HPV16、18、52、58、66等。结论:1、HR-HPV检出率产后明显低于孕期,总检出率近似于我国流行病学结果。按照三阶梯原则对异常者随访至产后12月:40%持续感染、60%转阴,比较两组年龄、分娩方式无显著差异;比较TCT异常率、进展数及HPV载量(≥10pg/ml)差异有统计学意义;持续感染者18%维持异常TCT、18%TCT升级、18%TCT反复不定,仅46%TCT维持为正常。以上数据充分说明妊娠期TCT异常与HPV持续感染密切相关,进一步分析分析原因后发现TCT结果同时与生殖道的细菌、滴虫、衣原体感染等也相关。规范的三阶梯有利于早期发现CIN,妊娠期筛查是安全必要的。2、hTERC表达:HR-HPV分组组中,阳性组中hTERC表达扩增率(25%)明显高于阴性组;细胞学分组中,正常组与异常组(50%)组间存在统计学差异;组织学分组中,炎症组(25%)与CIN组(92.3%)间也存在统计学差异。FISH技术检测宫颈脱落细胞中hTERC的扩增情况,有助于进一步探讨宫颈癌的发病机制,并为基因诊断提供理论依据。为妊娠期提供一种无创性诊断CIN的检查方法。3、母婴之间存在一定比例的HPV垂直传播率。