苏云金芽孢杆菌发酵培养基配方的优化

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:king20051400
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本论文通过不同的试验设计方法,对具较高杀虫毒力的苏云金芽孢杆菌WB7菌株进行摇瓶培养基最优化的研究,同时介绍了如何利用VB6.0实现优化过程的电算化。 通过培养基初筛和正交试验,优选出高水平的溶解性葡萄糖培养基配方:葡萄糖1%蛋白胨1%酵母膏0.6%,KH2PO4 0.2%,FeSO4·7H2O 0.002%,ZnSO4·7H2O 0.005%,MnSO4·H2O 0.005%,MgSO4·7H2O 0.03%。从试验的结果分析可以看出,起主导作用的是葡萄糖、蛋白胨及它们的交互作用。在无机盐中,MgSO4·7H2O、KH2PO4和FeSO4·7H2O对发酵液芽孢数的影响较为显著。 在确定了培养基的基本组成成分后,将葡萄糖作为碳源(x1),蛋白胨、酵母膏作为氮源(x2),KH2PO4作为磷源(x3),以芽孢数为响应值,通过二次旋转组合试验得到拟合效果较好的响应面方程: y=20.84+2.7345x1+3.0179x2-0.0389x3+2.0825x1x2-1.25x1x3-0.415x2x3-4.7568x12-3.2845x22-0.6334x32 从中获得碳、氮、磷三因素的最佳组合:碳源1.27%,氮源2.144%,磷源0.122%。 在以农副产品为主的工业培养基的优化过程中,采用均匀设计在一个大的水平范围内找出一个较好的初步优化点,然后再在这个点附近安排正交试验。正交试验结果表明,培养基中影响发酵液芽孢数的主要成分是玉米淀粉、黄豆饼粉、酵母粉和CaCO3;在含有黄豆饼粉的培养基中,再加入鱼粉并不会影响发酵液芽孢数,若加入量过大,反而会影响发酵液芽孢数和茵体的发育;合适的碳氮比至关重要。 以正交试验优选出的培养基为基本水平,采用二次正交旋转组合设计进一步做培养基配方优化试验。通过对回归模型进行主效应和互作效应分析,优选出产孢数高的培养基组合:玉米淀粉2.25%,黄豆饼粉2.6%,蛋白胨0.65%,鱼粉0.575%。
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