论文部分内容阅读
第一部分血管紧张素Ⅱ对白血病细胞增殖的作用及其受体的分布目的:研究血管紧张素Ⅱ对白血病细胞增殖的影响和血管紧张素Ⅱ受体在白血病患者骨髓单个核细胞上的表达,探讨其与白血病发生发展的可能关系。为研究白血病发病机制提供新思路。方法:1.收集初治急性白血病患者的骨髓单个核细胞,以血小板减少性紫癜患者作为对照组。运用免疫组化方法检测细胞血管紧张素Ⅱ受体蛋白表达。2.以人白血病细胞系K562为研究对象,采用RPMI-1640培养基进行体外培养,以终浓度为0、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的AngⅡ,分别在6h,12h,24h,48h作用于K562细胞,MTT法检测K562细胞增殖率。结果:免疫组化结果显示AT1R与AT2R在对照组及白血病患者单个核细胞的胞膜和胞浆中均有表达。白血病患者AT1R蛋白的表达显著高于AT2R蛋白的表达(p<0.05),正常对照组AT1R蛋白较AT2R蛋白表达水平低,但差异无显著性。K562细胞的增殖在一定范围内与AngⅡ浓度及作用时间呈正相关,在10-7mol/L作用6、12小时的增殖效率最显著。结论:白血病患者的骨髓单个核细胞胞膜和胞浆中都存在AngⅡ受体的表达,AT1R在白血病细胞上的优势表达可能是促进白血病发生发展的重要因素。AngⅡ能以时间和剂量依赖的方式促进白血病细胞的增殖。第二部分血管紧张素Ⅱ促进白血病细胞增殖机制的初步研究目的:研究受体拮抗剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)促进K562细胞增殖的影响,及AngⅡ对K562细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用,探讨AngⅡ促进白血病细胞增殖的作用机理和途径。方法:以人白血病K562细胞系为研究对象,采用RPMI-1640培养基进行体外培养,分别以AT1R和AT2R的拮抗剂(Valsartan和PD123319)预处理K562细胞30min,以MTT法观察它们对血管紧张素Ⅱ促K562细胞增殖的影响。通过ELISA方法分析AngⅡ对K562细胞分泌VEGF的调节。结果:AngⅡ(10-7mol/L)引起K562细胞明显增殖, AT1R拮抗剂Valsartan(10-6mol/L)能完全抑制AngⅡ的促增殖效应,而AT2R拮抗剂PD123319对AngⅡ的增殖效应无明显影响。Valsartan单独作用不引起K562细胞凋亡。AngⅡ使K562细胞分泌的VEGF升高,而AT1R的拮抗剂Valsartan能有效的抑制AngⅡ的效应。结论:AngⅡ通过激活AT1R促进K562细胞增殖。另外AngⅡ能通过AT1R途径增加K562细胞自分泌VEGF,促进白血病的血管新生,从而有利于白血病细胞的生长。