喹乙醇（Olaquindox,OLA）是化学合成的喹噁啉类广谱抗菌药物,具有蛋白同化作用,可提高饲料转化率与瘦肉率,促进动物生长,也可用于预防和治疗细菌感染性疾病。但是在生产实践中,喹乙醇的不规范使用不仅直接危害动物机体的健康,还可以通过食物链对人类健康造成极大的危害。随着科学技术的发展和国家的重视,其检测方法也不断发展。目前已有电化学分析法、光谱法、色谱法、液相色谱-质谱联用技术、免疫分析技术等检测方法。为了建立快速、灵敏的喹乙醇残留免疫学分析方法,本研究在分析喹乙醇免疫学特性的基础上,运用单克隆抗体技术制备了喹乙醇单克隆抗体,并组装了间接竞争ELISA试剂盒。主要研究结果如下:1.喹乙醇人工抗原的制备与鉴定琥珀酸酐法合成衍生物喹乙醇-半琥珀酸酯（OLA-HS）;活化酯法合成全抗原OLA-BSA、OLA-OVA,紫外分光光度法（UV）、凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定;用OLA-BSA免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定多抗血清效价,间接竞争ELISA鉴定其敏感性、特异性。紫外扫描图谱显示合成的人工抗原的最大吸收峰发生偏移,证明偶联成功,并测得OLA-BSA、OLA-OVA中OLA-HS和BSA、OVA的分子结合比分别为分别为17.1:1和12.4:1;SDS-PAGE结果表明BSA的泳动速度大于OLA-BSA,说明OLA-BSA的分子量大于BSA,进一步说明OLA-HS与BSA偶联成功。3#小鼠抗血清的效价最高,对OLA的半数抑制浓度（IC50）为58.923 ng/mL,与卡巴氧的交叉反应率为1.841%,与其他药物无交叉反应。通过实验获得了高价、敏感、特异的多克隆抗体（pAb）。2.喹乙醇单克隆抗体的制备及免疫学特性的鉴定间接ELISA和间接竞争ELISA选择细胞融合备用鼠;杂交瘤技术制备喹乙醇单克隆抗体（OLAmAb）,并对其效价、亲和力、敏感性、特异性、亚型进行鉴定;体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。筛选出了2B1、4F5、4E12、5B5、5E5五株敏感特异的杂交瘤细胞;鉴定单抗亚型均为IgG1;细胞培养上清间接ELISA效价在1:3.0×102¹:1.28×10³之间,4E12细胞株制作的腹水效价为1:5.12×10⁵,OLAmAb亲和常数Ka为3.75×10¹⁰L/moL,对OLA的IC50为1.66ng/mL;与卡巴氧的交叉反应率为5.19%,与其它类药物无交叉反应。通过试验获得了高效价、敏感、特异的OLAmAb,可用于动物性食品中OLA的残留检测的免疫学试验。3.喹乙醇残留免疫学快速检测方法的建立根据酶联免疫吸附试验原理,应用OLAmAb研制出OLA残留快速检测间接竞争ELISA试剂盒（OLA-Kit）,OLA-Kit的标准曲线呈S型,符合4参数logit曲线拟合,最低检测限为0.126μg/L,半数抑制浓度IC50为1.66ng/mL,平均批内和批间变异系数小于<15%。对猪肝、猪肉分别添加2、10、50、100ng/mL OLA标准品,平均回收率分别为77.6%和79.68%。OLA-Kit性能稳定,在4℃可保存6个月。