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[目的]以RNA干扰(RNAi)技术沉默Gα13基因的表达，观察其对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与转移相关能力的影响，探索其作用机制，为肿瘤治疗提供新的策略。
[方法]根据人Gα13基因序列及二级结构特征，依据Tuschl等设计shRNA的原则，确定Gα13干扰位点，以ShuttleVector1.0-CMV为载体，以定向克隆的方法构建针对Gα13的shRNA重组表达质粒；电泳法初步筛选正确的重组克隆；DNA测序验证重组克隆的正确性；重组质粒与绿色荧光表达蛋白表达质粒pEGFP-N1共转染人卵巢癌细胞HO-8910PM，荧光显微镜观察转染效果；RT-PCR检测在mRNA水平对Gα13表达的影响；Westernblot检测在蛋白水平对Gα13表达的影响。MTT法检测Gα13沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖影响；流式细胞术检测Gα13沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞周期的影响及凋亡情况；Transwellchamber法检测Gα13沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭能力和趋化性运动能力的影响；细胞-基质粘附实验检测Gα13沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞粘附能力的影响；细胞骨架抽提术观察Gα13沉默后对细胞骨架的影响；放射自显影法检测Gα13沉默后对Rho活性的影响。
[结果]成功构建了针对人Gα13四个不同位点的shRNA表达质粒，能够正常测序，并且测序结果证实了插入的转录模板完全正确；脂质体介导下重组shRNA表达质粒的转染效率比较高；与未处理组比较，RNAi可使Gα13的mRNA和蛋白水平均明显下调，其中针对B位点的RNAi作用效果最明显；RNAi沉默Gα13表达后对人卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖、侵袭与运动都具有一定程度的抑制作用，对细胞的粘附能力无明显影响；RNAi作用后，阻断细胞于S期，无凋亡峰；RNAi沉默Gα13表达后能改变细胞骨架结构和明显降低Rho活性。
[结论]针对Gα13基因设计和构建的重组shRNA表达质粒可对人卵巢癌HO-8910PM细胞内的Gα13基因实现RNAi效应，明显下调Gα13的mRNA和蛋白水平；Gα13基因沉默后能抑制人卵巢癌HO-8910PM细胞的增殖、侵袭和运动，并影响细胞的周期；其作用机制与Gα13沉默后，能特异性封闭LPA受体信号途径，从而改变细胞的骨架和抑制溶血磷脂酸激活Rho活性；提示其具有抗卵巢癌生长和转移的潜能，有开发成治疗卵巢癌的RNAi药物的潜力和价值。