椎间盘退变是椎间盘突出的根本原因，目前已经确认TGFβ1有逆转椎间盘退变的效应，但因蛋白在体内易降解失活，因此直接局部注射疗效短暂。转基因治疗理论上可以“一劳永逸”，得到长期疗效。载体的选择和构建是基因治疗成败的关键，腺病毒载体在体内体外都有较高的感染效率，并能感染非分裂期细胞，因此适用于代谢和分裂极不活跃的椎间盘细胞。目的：构建一个高效的腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1，为进一步研究椎间盘退变的基因治疗作准备。材料和方法： 本研究采用了在原核细胞中同源重组的构建方法。首先将hTGFβ1 全长cDNA用HindIII和XhoI双酶切，克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上，得到重组体pShuttle-CMV-hTGFβ1用PmeI酶切线性化后与腺病毒主干质粒pAdEasy1（去除了E1和E3区）电穿孔法共转染大肠杆菌（BJ5183），两者在BJ5183内进行同源重组获得重组质粒pAd/CMV-hTGFβ1。重组质粒脂质体转染293细胞，在293细胞中包装成完整的腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1。结果：重组质粒用BamH I酶切得21kb,10kb和4kb三个片段，Pac I酶切得32kb和3kb两个片段；感染的293细胞出现了明显的细胞病变效应（CPE）；PCR扩增出了589bp的片段, 证实了重组腺病毒的存在；免疫组织化学染色证实了hTGFβ1在293细胞中的表达。结论：腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1构建成功为进一步的研究椎间盘退变的基因治疗打下了基础。