目的:肌腱移植是肌腱缺损后重建的最常用手段,可选择的移植物类型包括:自体肌腱、同种异体肌腱、异种肌腱及组织工程肌腱。其中,自体肌腱因其具备良好的骨-腱整合能力、无免疫排斥反应及无疾病传播风险而一直被认定为肌腱移植的“金标准”。然而,自体肌腱移植也常常导致供区并发症的发生,同时当缺损较大时自体肌腱将无法满足用量需求。同种异体肌腱因其无供区相关的并发症发生、不受移植用量限制等诸多优点而逐渐被临床医生用作自体肌腱肌腱移植的一种替代物。尽管如此,异体肌腱的使用也增加了免疫排斥的风险,严重的免疫排斥反应将导致肌腱移植失败。因此,为降低同种异体肌腱的免疫原性,目前已有多种可供选择的处理方式。本研究的目的则是比较不同的处理方式[深低温冷冻、95%酒精脱细胞、磷酸三丁酯(trinbutyl phosphate,TBP)脱细胞及十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)]对异体肌腱的生物学特性的影响。方法:将24小时内新鲜取材的尸体肌腱随机分成五组,其中一组未经任何处理作为空白对照样品待测;其余四组分别经过-80℃深低温储存90天、95%酒精浸泡96小时、1%TBP浸泡48小时及1%SDS浸泡24小时四种不同处理后作为试验样品待测。每组分别取10个样品依次进行循环加载试验及拉伸断裂试验,绘制位移-载荷曲线及应力-应变曲线,并计算以下生物力学指标:循环蠕变、极限载荷、最大位移、最大应力、最大应变、弹性模量、屈服强度及能量吸收。每组分别取5个样本充分冻干后进行DNA含量检测,计算肌腱干重中的DNA含量。对以上生物力学指标及DNA含量数据,首先使用Shapiro-Wilk检验及修正Bartlett’s检验对其正态性及方差齐性进行检验。对满足正态性及方差齐性的指标采用单因素方差分析及事后Turkey法多重比较进行差异检验,其余采用Kruskal-Wallis检验及事后Dunnett’s法多重比较进行差异检验。组织形态学采用HE染色、DAPI(4,6-diamidino2-phenyl-indole dihydrochloride,4,6-联脒-2-苯基吲哚)染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜进行观察。结果:循环加载试验发现各组肌腱之间循环蠕变量总体差异显著(F=4.328,p=0.005),事后Turkey法检验95%酒精脱细胞后肌腱循环蠕变较新鲜肌腱降低(p=0.002)。拉伸断裂试验各项指标经统计检验均无显著差异(p>0.05),事后Dunnett’s法多重比较仅发现SDS脱细胞后肌腱弹性模量较新鲜肌腱显著降低(p=0.044)。与新鲜肌腱相比,深低温冷冻组、95%酒精组、TBP组及SDS组肌腱残余DNA含量均显著下降(p<0.001)。HE染色及甲苯胺蓝染色显示与新鲜肌腱相比,深低温冷冻肌腱组织中仅存少量散在细胞核成分,而95%酒精组、SDS组及TBP组肌腱几乎无残存细胞核;95%酒精组、SDS组及TBP组胶原纤维结构较新鲜组及深低温冷冻组间隙增大并出现部分断裂纤维。DAPI染色显示深低温冷冻组仅有少量残存的蓝色荧光细胞核,而95%酒精组、SDS组及TBP组无明显蓝色荧光染色的细胞核存在。透射电镜显示与新鲜肌腱及深低温冷冻肌腱相比,95%酒精、SDS及TBP脱细胞后导致胶原纤维间隙稍增大,且细纤维/粗纤维比例增多。结论:深低温冷冻、95%酒精脱细胞、SDS脱细胞及TBP脱细胞均能有效去除同种异体肌腱中的免疫原性成分,使得肌腱中的残余细胞数及DNA含量明显降低。其中,深低温冷冻处理对肌腱组织学及生物力学几乎无损伤;而95%酒精、SDS及TBP脱细胞法对肌腱的组织学及生物力学产生不同程度的损伤。