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海藻糖因具优良特性而应用前景广阔。自海藻糖酶转化法发明之后,其成本大大降低使得其商业化应用成为现实。其中海藻糖合成酶法仅需一步就可将成本低廉的麦芽糖转化为海藻糖,比双酶转化法更具优势,因而成为近十几年的研究热点。为寻找耐热且活性高的海藻糖合成酶,本论文研究比较了三种不同的海藻糖合成酶生产方法。一是进行了海藻糖合成酶产生菌的筛选,最终筛选到1株海藻糖合成酶产生菌菌株L1204,分析表明其所产海藻糖合成酶虽有一定酶活性,但活性不够高;二是从能得到的海藻糖合成酶生产菌株出发,尝试构建重组海藻糖合成酶生产菌株,如从中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)购买了谷氨酸棒杆菌和耻垢杆菌进行海藻糖合成酶基因的克隆和表达研究,可能受原料、试剂、操作等诸多因素的影响,耻垢杆菌并未获得有关文献所报道的结果,而谷氨酸棒杆菌所得结果与文献报道结果吻合;三是利用现代生物信息学手段对已知基因序列进行分析研究,设计了2个基因序列,委托生物公司进行人工合成及基因工程菌构建,然后对其酶学性质进行了验证,获得了比较理想的能生产海藻糖合成酶的基因工程菌TSG2013。为下一步利用(大米)淀粉或麦芽糖浆为原料生产海藻糖的研究打下了基础。比较三种不同的海藻糖合成酶的生产方法的研究结果,可以发现海藻糖合成酶产生菌的筛选虽然工作量巨大而艰辛,但仍是获取新型海藻糖合成酶的重要途径;从已知的能产海藻糖合成酶的菌株出发进行基因克隆和表达,从理论上讲,其相对工作量大大减少且成本低廉,但在实际操作上对菌种原料、试剂和操作等各环节均需特别小心,否则难以得到预期结果;而通过有关资料选定和设计新型海藻糖合成酶基因序列,委托相关生物公司合成序列及其基因工程菌,虽然最初成本高一些,但可大大缩短研究时间,并可保证研究质量,因此,是一种最有潜力的海藻糖合成酶的生产方法。