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近年来由于环境污染物对生殖和发育危害的后果突出,被认为可能是造成不孕、流产、功能异常和畸形等因素之一。有研究表明动物生殖和胚胎过程对环境毒物更加敏感。因此,环境污染对生殖和发育的危害成为生殖和发育毒物学中重要的研究内容。胚胎发育早期阶段对环境污染物非常敏感,是由于在所有卵裂细胞中发现雌激素受体贯穿于整个小鼠胚胎植入发育时期。因此,在孕早期体内暴露外源性雌激素可改变小鼠和其他哺乳动物发育进程。研究小鼠妊娠早期体内甲氧滴滴涕(methoxychlor, MXC)染毒对孕鼠生殖和生后子代发育的长期毒性作用结果,探讨了MXC染毒后胎盘雌激素受体α(Estrogen receptorα,ERα)、雌激素受体β(Estrogen receptorβ,ERβ)表达及其作用机制。本实验分为以下二部分:一、甲氧滴滴涕染毒孕鼠模型的构建及其对孕鼠的毒性作用将交配成功的80只雌性昆明小鼠随机分为5组,建立孕早期MXC染毒孕小鼠模型,于妊娠第0.5～7.5d每日皮下注射不同剂量MXC一次,以芝麻油溶剂为阴性对照组,雌二醇为阳性对照组,MXC溶于芝麻油,于GD17.5称重并处死孕鼠,称重脏器重量,计算脏器系数,观察各组孕鼠黄体和着床数等指标,并观察妊娠结局,并采用放射免疫法检测孕鼠血清雌二醇(E2 )和孕酮(P)含量。采用光镜及电镜形态学变化胎盘组织。结果表明:①随着MXC染毒剂量的增加和作用时间的延长,孕鼠体质量增长减少,MXC染毒剂量为166.67 mg/kg组在GD14.5、GD17.5体质量和体质量增加值分别为(43.51±2.03), (15.59±1.18),(46.79±2.53),(18.87±0.55);呈不同剂量间差异( P < 0.05)。②随着MXC注射剂量的增加,母鼠子宫着床数减少,活胎数下降,不良妊娠结局(死胎、吸收胎数)增多;③随MXC染毒剂量增加,孕鼠血清中P水平升高,呈不同剂量间存在显著性差异( P < 0.05);④M XC染毒组胎盘海绵滋养层细胞特别是糖原细胞内的糖原含量与对照组相比显著减少。结论:①MXC可干扰孕小鼠的生殖功能和激素水平,孕鼠体质量和肝脏相对体质量随剂量的增加有下降趋势,而血清P含量降低,引起黄体数量和着床数减少,不良妊娠结局增加;②MXC可通过降低胎盘的糖原贮存.使其葡萄糖释放量下降,进而使胚胎发育过程中所必需的能量供应不足,影响胎鼠正常发育;③MXC染毒作用最显著的剂量为166.67mg/kg。二、甲氧滴滴涕染毒对仔鼠生长发育及生殖功能的毒性作用研究建立孕早期MXC染毒孕小鼠模型,将孕小鼠随机分为芝麻油对照组、5.0mgMXC组(166.67mg/kg)、1.0mg雌二醇组(0.033mg/kg)。妊娠并自然分娩,检测胎仔数,出生时的性别比率,检测两性别子代的肛门与生殖器间距离(AGD),同时检测雌性子代阴道开放时间。采用放射免疫法检测雄性子代血清黄体生成素(LH )、卵泡刺激素(FSH)和睾丸酮(T)含量。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学染色技术(SP)检测各组胎盘ERα、ERβ受体的表达。结果表明:①暴露雌二醇或MXC并未改变出生时的性别比率,但是胎仔数减少;②PND21,在孕早期暴露雌二醇或MXC雄性仔鼠AGD比对照组短,这个变化在MXC处理组最明显。在MXC暴露后雌性子代的AGD没有受到影响。但是雌二醇处理组雌性小鼠的AGD比对照组记录更长;③孕早期暴露雌二醇或MXC也加速性成熟,表现为更多的雌性小鼠在断奶时出现明显早熟的阴道开放现象;④MXC处理组的雄性小鼠可降低血LH和FSH但是不改变睾丸酮水平。⑤MXC或E处理组胎盘组织ERα在蛋白水平和mRNA水平的表达均明显高于芝麻油对照组,有显著性差异( P<0.05)、ERβ的表达无显著性差异。结论:①研究显示在孕早期暴露MXC或雌二醇造成在两性子代断乳后长期的性发育改变;②M XC可阻滞两性子代的发育和体重;③胎盘组织ERα、ERβ受体的蛋白水平与mRNA水平相一致,不存在蛋白翻译的障碍;MXC作用机制可能与其胎盘绒毛滋养细胞ERα高表达有关。