采用一次性密度梯度离心法从正常人血浆中分离得到的低密度脂蛋白(LowDensityLipoprotein，LDL)经体外Cu2+氧化法制备的氧化LDL(OxidizedLDL，OxLDL)做为免疫原，通过杂交瘤技术构建筛选了可稳定表达特异性高亲和力的抗OxLDL单克隆抗体杂交瘤细胞。分别建立了适用于实验室规模以及生产规模的抗OxLDL单克隆抗体制备方法。并根据双抗体夹心法原理，采用自行构建的抗OxLDL单克隆抗体及酶标记抗载脂蛋白B抗体，建立了OxLDL酶联免疫检测法。方法学研究表明，该法重复性好，准确性高，血浆中的其他脂蛋白及内源性干扰物质不干扰检测反应。根据该法组装的OxLDL酶联免疫检测试剂盒与瑞士Mercodia公司同类产品的各项性能指标均较接近。对该试剂盒临床检测性能的考核评价结果表明该试剂盒与瑞士Mercodia公司同类产品的临床检测性能基本一致，在该试剂盒检测系统下测定的血浆OxLDL含量正常值参考范围为≤45.20U/ml，可疑值范围为36.90U/ml～47.80U/ml，诊断临界值为47.70U/ml，在该诊断临界值下，该试剂盒诊断冠心病的灵敏度为87.50％，特异度为89.89％。 本研究研制的OxLDL酶联免疫检测试剂盒填补了目前国内此方面空白，为测定血浆OxLDL含量提供了一种准确、简便、快捷的方法，也为临床预测冠心病发病危险性、诊断冠心病、判断病变严重程度以及观察疗效、评判预后提供了新的更有效的检查手段。