【摘 要】
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细胞标记和追踪是细胞生物学和发育生物学研究领域中的一个重要方法和手段。一种新颖、有效且便于操作的细胞标记和追踪方法有可能对相关领域的研究产生意义深远的影响。但是
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细胞标记和追踪是细胞生物学和发育生物学研究领域中的一个重要方法和手段。一种新颖、有效且便于操作的细胞标记和追踪方法有可能对相关领域的研究产生意义深远的影响。但是,目前还没有一种细胞标记方法可用于准确地追踪单个细胞及其后代。为弥补这一技术空白,我们设计了一个基于Cre-loxP和Flp-Frt位点特异性重组系统的多个细胞标记技术。这一技术的核心包括两个部分:由四个Frt片段组成的细胞基因组标签,以及催化该标签发生随机重组因而可产生八种多样性的Cre/Flp双重组酶瞬时表达载体。我们成功地将单个Frt标签插入293FT,并验证了Cre/Flp双重组酶瞬时表达的特性。利用这一技术,我们有望从单克隆的293FT细胞培养出八种携带永久性不同标签的293FT克隆。通过增加Frt片段的数目,理论上,我们将可能对单个组织干细胞进行标记并追踪其后代,从而直接验证单个组织干细胞是否具有多潜能性。因此,这一新颖、独特的细胞标记技术将可能对细胞生物学和发育生物学研究产生重要影响。
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