解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）LJ02是一种非常有效的生物防治菌剂,为解析其免疫效应和免疫因子,以黄瓜灰霉和TMV为靶标进行了相关研究,主要内容如下:我们通过在表型、细胞和分子水平上对黄瓜中的Botrytis cinerea进行LJ02介导的诱导抗病性研究,深入了解了LJ02激活的植物防御机制的生理和分子基础,以防治灰霉病。我们评估了LJ02介导的烟草抵抗TMV的能力,用硫酸铵粗提LJ02蛋白并对其诱导免疫能力进行测定,对活性物质纯化条件进行了初步探索,确定了免疫蛋白的分子大小区间。完成了LJ02的FOSmid基因组文库的构建,并对其相关免疫基因进行筛选,获得了多个免疫克隆子,并对1-1F5号克隆进行了分析。具体研究内容与结果如下:1.解淀粉芽孢杆菌LJ02具有在黄瓜植株内的内生定殖能力。随时间变化,植株内定殖菌量不断增多,菌体由根部进入植株,在植株根部、茎部、叶部定殖。2.我们通过对LJ02诱导黄瓜抗灰霉的能力进行评估,确定了其发酵上清液和菌体悬浮液均具有优良的诱导免疫效果,且诱导黄瓜抗灰霉的持效期均至少可达11天,且原液与100倍稀释液效果最好,灌根施用方式效果最佳。3.利用荧光定量PCR技术对LJ02介导的黄瓜植株免疫反应的信号传导机制进行研究,通过测量代表SA、JA、ET信号的PR-1、LOX-1、ETR-1基因,确定了解淀粉芽孢杆菌LJ02通过同时激活水杨酸、茉莉酸和乙烯信号传导途径诱导黄瓜植株的免疫反应。4.通过生物检测确定了解淀粉芽孢杆菌LJ02发酵上清液对烟草抗TMV具有保护活性、钝化活性和诱导活性,其对TMV的抑制率分别为97.06%、95.31%、89.19%。LJ02粗提可溶性蛋白和不溶性蛋白中均具有免疫能力,主要免疫因子在可溶性蛋白当中且分子量大于8KDa,而在不溶性蛋白中主要免疫因子分子量大小在1KDa～8KDa之间。5.完成了LJ02的FOSmid基因组文库的构建,1.2×10~4个克隆总数覆盖LJ02全基因组117倍。用烟草植株筛选出免疫克隆子11个,对1-1F5号克隆的基因功能进行了分析和外泌蛋白进行了预测。