“乳移平”抗乳腺癌成分及药效的研究

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目的:乳移甲复方具有解毒散结的作用,在防治乳腺癌术后复发转移方面有一定疗效。本课题拟对乳移平的化学成分、治疗乳腺癌的药效及作用机制进行初步的研究。  方法:首先从质量评价方面,采用薄层色谱对乳移平及其单味药材淫羊藿进行定性研究;采用高效液相色谱法建立指纹图谱,对乳移平复方及其原料药进行定量研究。  关于药效研究方而,分别从体外试验和体内试验两方面着手:体外试验方面,采用荧光素酶报告系统(luciferase),研究乳移平对炎症和肿瘤等相关生物信号通路的影响;采用乳腺癌细胞(MCF-7细胞),研究乳移平与阿霉素合用时的增效减毒作用;体内试验方面,采用斑马鱼模型,研究乳移平抑制斑马鱼血管新生作用。  关于抗肿瘤机制方面,采用western boltting,从细胞凋亡的角度,探讨乳移平对MCF-7细胞凋亡相关蛋白的影响。  结果:质量评价方面,在现有的色谱条件下,乳移平各色谱峰得到了良好的基线分离,一共得到10个共有峰,其中淫羊藿苷成分可作为质量控制指标。  体外药效方面,荧光素酶报告系统结果显示:乳移平及部分原料药可能抑制293TGFβ表达;MTT实验结果显示:乳移平干浸膏和淫羊藿苷能够增强阿霉素对乳腺癌细胞的抑制作用。  体内药效试验方面,斑马鱼试验结果表明:虽然乳移平原料药材及相关化合物组对斑马鱼节间血管无明显作用,但是乳移平复方对斑马鱼的节间血管有一定的抑制作用。  关于作用机制方面,western boltting试验结果表明:乳移平干浸膏能下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,淫羊藿苷能下调Bcl-2、Akt抗凋亡蛋白,上调Bax、Parp等凋亡蛋白。  结论:乳移平的质量可控,其质控成分可选用淫羊藿苷;乳移甲药材及其成分显示抗乳腺癌细胞生长作用,其抗乳腺癌作用可能与抑制TGFβ表达、促进细胞凋亡及抑制血管新生有关。
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