上皮性卵巢癌高表达MINA促进细胞增殖并抑制细胞凋亡

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目的:研究MYC诱导核抗原(MYC-induced nuclear antigen,MINA)对上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)增殖和凋亡的作用,探究MINA参与细胞生长调节的具体机制。方法:1.实验材料:4例正常卵巢上皮组织,40例上皮性卵巢癌组织;人正常卵巢上皮细胞株:IOSE 80,人上皮性卵巢癌细胞株:A2780、HO8910、HEY、SKOV3。2.实验方法:首先应用免疫组化技术检测并分析MINA在EOC组织和正常卵巢上皮组织中的表达情况。用Western Blotting技术检测MINA蛋白在四种上皮性卵巢癌细胞A2780、HO8910、HEY、SKOV3及正常卵巢上皮细胞IOSE 80中的表达情况。应用特异性siRNA在EOC细胞中下调MINA的表达后,采用CCK8方法检测细胞增殖能力的变化;用Transwell细胞迁移实验检验细胞迁移能力的改变;利用流式细胞术(flow cytometry,FCM)研究细胞周期及凋亡的变化,Western Blotting检验细胞周期蛋白cyclin D1、cyclinE1,周期蛋白依赖性激酶CDK2、CDK4和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的变化以及H3K9me1、H3K9me2、H3K9me3表达水平的改变。结果:1.MINA在上皮性卵巢癌的表达水平与有无淋巴结转移(P=0.042)、FIGO分期(P=0.003)以及细胞分化程度(P=0.004)显著相关,而与患者年龄、血清CA125和HE4水平无明显相关关系;2.MINA在上皮性卵巢癌组织和细胞系中的表达水平均高于正常卵巢;3.下调MINA表达可以抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖;4.下调MINA表达可以降低上皮性卵巢癌的迁移能力;5.干扰MINA表达后,卵巢癌细胞的周期停滞在G2/M,G0/G1期,CDK2、CDK4、cyclinD1、cyclinE1 表达量下降;6.干扰MINA表达后,卵巢癌细胞的凋亡能力上升,促凋亡蛋白表达增加,抗凋亡蛋白表达减少;7.MINA通过调控组蛋白H3K9me3的去甲基化修饰途径从而影响细胞的周期和凋亡。结论:MINA在上皮性卵巢癌组织和细胞系中高表达,促进细胞增殖,引起细胞周期停滞,抑制细胞凋亡。MINA可能通过调控组蛋白H3K9me3的去甲基化修饰途径从而影响细胞的生长。
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