背景及目的:间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征（Interstitial Cystitis/Bladder Pain Syndrome,IC/BPS）是一种病理机制还未完全明确的膀胱疾病,其主要临床表现是下尿路症状（如尿频、尿急及夜尿增多）和盆腔区域疼痛（如会阴部、耻骨上疼痛）。虽然目前其病理机制仍未完全明确,但越来越多的研究提示膀胱传入神经敏化参与了IC/BPS的发病机理。膀胱传入神经敏化表现为膀胱传入神经激活阈值降低、神经电活动增加,对外界各种伤害性及非伤害性刺激反应增强。根据其理论,临床和动物实验证明,通过膀胱内灌注树脂毒素、肉毒毒素和利多卡因等方式以阻断神经电活动或使神经脱敏,可在一定程度上缓解膀胱过度活动及疼痛症状。这说明针对传入神经敏化的靶向治疗将是治疗IC/BPS的一个重要研究方向。研究提示内源性大麻素系统参与了膀胱功能和痛觉的调控。通过使用经典大麻素受体激动剂,膀胱过度活动和疼痛症状得到了明显的改善,且其机制跟调控膀胱传入神经活动有关。G蛋白偶联受体GPR18是非经典大麻素受体,据报道其也参与了膀胱功能和疼痛的调控。然而,GPR18在IC/BPS中的表达、作用及机制目前仍未有研究。因此,本研究旨在探索GPR18在IC/BPS的表达、作用及机制,为IC/BPS的临床治疗提供新的理论基础。方法:第一部分:GPR18在环磷酰胺诱导膀胱炎中的表达及定位将雌性Sprague-Dawley大鼠随机分成环磷酰胺组（cyclophosphamide,CYP）和对照组（control,Con）。CYP组腹腔注射200mg/kg的环磷酰胺以构建IC/BPS的动物模型,Con组腹腔注射同等剂量的生理盐水。称量大鼠体重及膀胱湿重以评估膀胱重量的变化。HE染色用于观察膀胱组织学改变。足底机械痛觉阈值和膀胱功能测定用于分析痛觉和膀胱功能的变化。RT-PCR和Western blotting用于分析GPR18在膀胱中的表达量。免疫荧光用于确定GPR18在膀胱传入神经纤维和L6-S1背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）中的定位。第二部分:GPR18对疼痛和膀胱功能的影响及初步机制研究足底机械痛觉阈值和膀胱功能测定用于观察GPR18激动剂（消退素D2,Resolvin D2,Rv D2）和GPR18阻断剂（O-1918）对痛觉和膀胱功能的影响。RT-PCR和Western blotting用于分析瞬时受体电位香草素1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）在膀胱中的表达量。免疫荧光用于确定GPR18和TRPV1在DRG中的定位。钙成像实验用于分析Rv D2和O-1918对辣椒素激活TRPV1引起钙内流的影响。结果:1、在CYP组,膀胱湿重增加;HE染色显示膀胱上皮损伤脱落、粘膜下层水肿、粘膜下出血和炎症细胞浸润;足底机械痛觉阈值降低,排尿间隔缩短,而膀胱内最大压无明显改变;GPR18的m RNA和蛋白水平在膀胱中表达降低;GPR18的m RNA水平在DRG中降低。免疫荧光显示GPR18在所有大小的神经元中表达,且GPR18在CYP组DRG中表达也降低。2、在CYP组,通过鞘内注射Rv D2,足底机械痛觉阈值有所升高,排尿间隔延长,膀胱内最大压未受其影响,而O-1918可以阻断Rv D2的治疗效果。TRPV1的m RNA和蛋白表达水平在CYP组膀胱中上调。免疫荧光结果提示GPR18和TRPV1在DRG中共定位。钙成像结果提示,在CYP组,辣椒素激活TRPV1能引起更强的钙内流;在Con和CYP组,Rv D2都能抑制辣椒素激发的钙内流,而Rv D2的这种作用能被O-1918所阻断。结论:1、腹腔注射环磷酰胺可成功构建IC/BPS动物模型,其组织学和功能学改变跟IC/BPS基本一致。2、在CYP组,GPR18的表达在膀胱和DRG中下调。GPR18在膀胱传入神经纤维和DRG中表达。3、激活GPR18缓解了疼痛和改善了膀胱功能,其机制可能是通过抑制TRPV1实现的。