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目的:研究非折叠蛋白应答IRE1信号转导通路与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系,进一步了解动脉粥样硬化斑块的形成机制,进而为预防及治疗颈动脉粥样硬化提供依据。 方法:在符合伦理学等科学审查和患者知情同意的前提下,分析2018年1月-2018年12月大连市中心医院神经外科收治的年龄在60-80岁之间的颈动脉重度狭窄的患者.所有患者术前均要求低盐低脂饮食,禁忌吸烟饮酒情绪波动等,减少导致内质网应激相关因素,从术前一周开始至术后出院,统一服用同一药厂供应的抗血小板聚集药物和降血脂药物,术前完善血液化验检查,并排除肝炎病毒等传染性疾病及血液系统疾病,行头部、双肺CT检查及心脏超声,除外影响手术的其他疾病。颈动脉超声和(或)TCD检查,头颈部CTA、DSA或MRA确诊颈动脉狭窄程度为70-99%,软性粥样硬化斑块或有溃疡形成。诊断明确后,患者无明显手术禁忌症,我科在一年时间内顺利完成颈动脉内膜剥脱术100余例,每个患者颈动脉斑块均行HE染色,根据斑块稳定性的标准将所有标本分为稳定组(40余例)和不稳定组(70余例),并在每组中随机选取15例标本,进一步行免疫组织化学、Westen Blot及PCR检测。使用SPSS22.0软件对所有数据进行分析,统计结果分析以P<0.05有统计学意义,对比分析稳定组和不稳定组IRE1蛋白及CHOP蛋白的表达量。 结果:免疫组化结果采用Imag Pro Plus6.0(IPP)病理图像分析系统进行统计分析,不稳定组内质网应激相关调亡分子IRE1和CHOP蛋白呈强阳性表达,阳性产物为棕褐颗粒;稳定组内质网应激调亡分子IRE1和CHOP蛋白呈弱阳性表达,阳性产物为浅棕色颗粒。与稳定组相比,不稳定组IRE1和CHOP蛋白值显著增高。差异有统计学意义(P<0.05)Western blot结果显示两组均存在IRE1蛋白水平的表达,与稳定组比较,不稳定组斑块组织中IRE1蛋白表达增加,其吸光度比值显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),两组均存在CHOP蛋白水平的表达,与稳定组比较,不稳定组斑块组织中CHOP蛋白表达增加,吸光度值显著增高,差异有统计学意义(P<0.05) 结论:1、内质网应激上调CHOP表达在颈动脉粥样硬化中具有重要作用。 2、IRE1信号转导通路的激活在动脉粥样硬化的发生发展中起到了重要的作用,并且在颈动脉不稳定性斑块中比稳定性斑块中的表达量较多,大约是稳定性中蛋白含量的3倍。表明在颈动脉粥样硬化的发生发展过程中,IRE1信号通路开放的越多,斑块的性质越不稳定。 3、CHOP凋亡蛋白在动脉粥样硬化的形成与进展中起到关键作用,不稳定性斑块中CHOP凋亡蛋白大约是稳定性蛋白含量的3倍,表明在动脉粥样斑块的形成过程中,CHOP凋亡蛋白表达越多,斑块性质越不稳定。 4、不稳定性斑块与稳定性斑块中的IRE1和CHOP蛋白比值接近,均为3∶1,且蛋白的表达值相近。目前研究已知IRE1级联反应主要包含IRE1-XBP1与IRE1-JNK两条信号传导途径,而且在动脉粥样硬化晚期主要以IRE1-JNK凋亡途径为主,这是动脉粥样硬化斑块形成阻塞血管程度较轻时候的实验标本。本实验标本取自人类活体颈动脉重度狭窄手术患者,IRE1-JNK凋亡途径是动脉斑块轻度或中度狭窄时的通路,当颈动脉重度狭窄时,信号转到通路是否发生了变化,产生一条尚未发现的新的通路,比如IRE1-CHOP途径,因本实验的局限性尚未有足够的证据,但为发现IRE1在颈动脉重度狭窄斑块中是否存在新的信号转导途径提供新的思路。