SiO2-NPs致内皮细胞功能紊乱与黏附单核细胞的初步研究

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目的:研究二氧化硅纳米颗粒(SiO2-NPs)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和单核细胞(THP-1)的影响,为深入认识SiO2-NPs致动脉粥样硬化的潜在分子机制,科学评价其对心血管系统的潜在风险,以及指导合理使用提供基础科学数据。方法:透射电镜观测SiO2-NPs形状、大小及其在靶细胞中的分布;MTT法和CCK-8法分别检测SiO2-NPs对HUVECs和THP-1细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附及Western Blot技术检测目标基因(MCP-1、VCAM-1、sICAM-1、IL-6、IL-8、TNF-α、eNOS、ET-1、TF和PAI-1等)mRNA和蛋白的表达与释放。结果:SiO2-NPs多为圆形,粒径为20±1.2 nm,在PBS中有一定的团聚现象。SiO2-NPs可被HUVECs和THP-1吞噬吸收,主要分布在胞质中,并对两种细胞的增殖产生影响。此外,SiO2-NPs一方面可致eNOS表达降低,ET表达升高,使NO/ET分泌失衡;促进趋化因子(MCP-1)和黏附因子(VCAM-1、sICAM-1)的mRNA表达和蛋白的释放,呈现炎症反应;上调TF和PAI-1表达,干扰血凝/纤溶系统的正常功能;另一方面,可诱导THP-1内(促)炎症因子(IL-6、IL-8、TNF-α)的mRNA表达与蛋白释放,引发炎症效应。同时,SiO2-NPs可促进内皮细胞与单核细胞的黏附,并伴随相关炎症因子的表达与释放明显增强,高于其作用于单种细胞,表明其可促进这两种细胞的交互作用。上述SiO2-NPs对HUVECs和THP-1的毒理学效应均具一定的剂量-效应关系。结论:SiO2-NPs可致HUVECs功能紊乱;诱导THP-1的炎症反应;并促进内皮细胞与单核细胞的黏附。
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