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目的:肾细胞癌是肾组织肿瘤中最常见的一种肿瘤,而在肾细胞癌中又以肾透明细胞癌最为常见。鉴定调节肿瘤细胞转移的关键性蛋白对于这种致命性恶性肿瘤的预后预测、预防转移及治疗均具有重要意义。在本研究中,我们评估了几种常见肾癌细胞系及肾癌原发灶和转移灶组织芯片中趋化因子CX3CL1及其受体CX3CR1的表达情况,分析了CX3CL1及其受体CX3CR1在肾癌细胞粘附、迁移和转移中的作用及CX3CR的表达与肾透明细胞癌患者预后的关系,并且进一步研究了与CX3CL1-CX3CR1诱导的肾癌细胞迁移和转移相关的下游分子信号通路。方法:1.采用western-blotting实验方法和免疫荧光实验验方法检测CX3CL1及其配体CX3CR1在肾癌细胞系和正常肾组织上皮细胞293T中的表达情况;2.采用划痕实验和趋化运动实验方法检测CX3CR1配体CX3CL1对肾癌细胞运动能力的影响;3.采用MTT细胞增殖实验检测CX3CL1对肾癌细胞增殖能力的影响;4.采用免疫组化实验方法检测CX3CL1及其配体CX3CR1在78例原发肾癌组织芯片、16例正常肾皮质组织芯片和16例转移性肾癌组织芯片中的表达,分析CX3CR1表达和肾癌转移及预后的关系;5.采用western-blotting实验方法和inhibitory migration方法检测与CX3CL1-CX3CR1诱导的肾癌细胞运动相关的下游信号通路。结果:1.与正常人类胚胎源性肾组织上皮细胞293T相比,4种肾癌细胞系(786-0、Caki-1、A-498、SN12C)中CX3CR1的表达水平明显增高,而4种肾癌细胞系中CX3CL1的表达量则明显少于293T细胞。A-498和786-0胞膜上和细胞质中均有CX3CR1表达,Caki-1和SN12C仅有细胞质中表达CX3CR1;2. CX3CL1可以诱导膜表而高表达CX3CR1的肾癌细胞系趋化和迁移运动;3. CX3CL1与其G蛋白偶联受体受体CX3CR1结合后可以介导肾癌细胞系786-O中PI3K/Akt和MEK/ERK1/2信号通路的激活;4. CX3CL1诱导的肾癌细胞趋化运动依赖于Go/Gi-CX3CR1激活的PI3K/Akt和MEK/ERK1/2信号通路;5.肾透明细胞癌组织芯片免疫组化分析结果显示,CX3CR1表达量越高,肿瘤越容易出现术后转移(P<0.005),且CX3CR1的强表达与肿瘤患者的不良预后之间存在一个显著的正相关关系(P<0.01);6.肾癌转移灶组织芯片免疫组化分析结果显示,转移灶中CX3CR1的表达明显高于肾癌原发灶(P<0.005);7.与正常肾组织样本相比,肾透明细胞癌组织芯片中CX3CL1的表达阳性率极低,但肿瘤血管内皮细胞可表达CX3CL1。结论:1.与正常肾组织细胞相比,肾癌细胞系中CX3CR1表达水平增高,而CX3CL1表达水平降低,且肾癌转移灶CX3CR1的表达量高于原发灶;2.体外实验表明CX3CL1-CX3CR1与肾癌细胞的迁移有关;3.体内试验表明CX3CL1-CX3CR1与肾癌转移有关;4.临床和分子细胞学证据表明CX3CR1是肾透明细胞癌预后和治疗的潜在生物学标志物和治疗靶点。