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本文以奶牛为试验动物,卵清白蛋白(OVA)和金黄色葡萄球菌乳房炎菌苗为抗原,研究人参皂甙的免疫佐剂作用。研究分三部分进行: 1 鲎试剂凝胶法检测人参皂甙中的内毒素 采用鲎试剂凝胶法检测人参提取物和人参皂甙Rb1中的内毒素含量。结果表明人参提取物和人参皂甙Rb1对凝胶法检测内毒素无干扰作用,内毒素含最小于0.5EU/ml。 2 人参皂甙对奶牛体液免疫作用的影响 将36头奶牛随机分成6组,分别颈部肌内注射生理盐水、4mg OVA、4mg OVA和3%氢氧化铝、4mg OVA和不同剂量(4mg、16mg、64mg)人参提取物(主要成分为人参总皂甙),2周后加强免疫1次。分别于第1次免疫注射前6天和3天,二次免疫后第1、2、3、4和5周采集血样和乳样,用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和乳清中的抗OVA抗体效价。结果表明:人参提取物能够显著提高奶牛血清和乳清抗OVA抗体效价,其中4mg人参提取物诱导产生的血清和乳清中抗体效价最高。18头注射人参提取物和OVA混合液的奶牛,只有1头出现局部轻微肿胀,2天后即消失:而注射了氢氧化铝和OVA混合液的6头奶牛,有5头出现局部肿硬,持续时间长达14天;奶牛牛奶中的抗体效价远低于血液。 3 人参皂甙对奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎菌苗的免疫佐剂作用 将18头12~14月龄的青年牛随机分成3组,分别颈部肌内注射5ml金黄色葡萄球菌乳房炎菌苗、相同剂量菌苗混合4mg人参提取物或1mg人参皂甙Rb1,并在2周后加强免疫1次。分别于第1次免疫注射前6天和3天,二次免疫后第1、2、3、4和5周每周采集血样,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中的抗金黄色葡萄球菌抗体效价,BrdU-ELISA法检测奶牛血液淋巴细胞增殖能力。结果表明:人参提取物和 砌人人哆’‘肋/”辽 人\厂川”V处/、bv凸”力从戊尤《/材川”。h出儿”乃川人参’Z贰 Rb均能够诱苛奶牛,‘’‘生史尚的仇今柞色仙的球凶抗体效价和史强的淋巴细胞增殖能力,人参皂队Rb 效果优于人参提地物。门头注射菌茁和人参皂成混合液的奶牛,无局部副作J日,斡山人参捉耿物和人参’m代*hi y个,卜良好。 人参提耿物和人参皂贰*hi 个仅具有工乙著的抡疫佐剂们川],而且安全性良好。其中人参皂贰 Rb效果优于人参提取物。