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背景多纳非尼是索拉非尼的氘代衍生物,是我国开发的处于临床试验阶段的抗肿瘤新药。目的建立准确、灵敏的液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中的多纳非尼及其N-氧化物,并将确证后的方法应用于甲苯磺酸多纳非尼片的人体药动学研究。方法由于多纳非尼是索拉非尼的氘代衍生物,所以选择索拉非尼作为LC-MS/MS检测多纳非尼的内标非常理想。同理,选择索拉非尼N-氧化物作为多纳非尼N-氧化物的内标。取血浆样品100?L以乙腈沉淀蛋白处理,待测物和内标经Gemini C18（50 mm×2.0 mm,5μm）色谱柱分离,以5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.2%甲酸）-乙腈为流动相梯度洗脱,色谱运行时间为5.0 min。采用电喷雾电离源（ESI源）,以多反应监测模式（MRM）检测。用于定量分析多纳非尼及其内标索拉非尼的离子转化分别为m/z 468.2→m/z 273.2和m/z 465.2→m/z270.2,用于定量分析多纳非尼N-氧化物及其内标索拉非尼N-氧化物的离子转化分别为m/z 484.2→m/z 289.2和m/z 481.2→m/z 286.2。结果多纳非尼和多纳非尼N-氧化物定量分析分别在5.005000ng·mL-1和1.001000 ng·mL-1范围内线性良好。待测物低、中、高质控样品的日内和日间的精密度和准确度均符合生物样品测定相关要求。人血浆样品室温放置6 h、血浆样品预处理后室温放置24 h、血浆样品经历三次冷冻解冻循环、血浆样品-70?C放置51天、血浆样品-70?C放置302天、血浆样品-20?C放置302天,结果表明:多纳非尼及多纳非尼N-氧化物的人血浆样品在上述储存条件下均稳定。多纳非尼在低、高两浓度经内标校正的基质效应因子分别为106%和108%,相对标准差均小于2.5%;多纳非尼N-氧化物在低、高两浓度经内标校正的的基质效应因子分别为93.7%和101%,相对标准差均小于2.8%。结果表明,在本试验条件下,可忽略基质对多纳非尼和内标索拉非尼及多纳非尼N-氧化物和内标索拉非尼N-氧化物测定的影响。将确证后的方法应用于甲苯磺酸多纳非尼片的人体药动学研究。结论本实验建立了准确、灵敏的LC-MS/MS法同时测定人血浆中多纳非尼及其N-氧化物的分析方法,进行了完整的方法验证,并成功应用于甲苯磺酸多纳非尼片首次临床试验的人体药动学研究。结果表明,对于氘代药物,采用非氘代原形和代谢物作为内标,非常有利于药动学生物样品分析。