论文部分内容阅读
背景与目的：糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一，是DM的主要死亡原因。根据流行病学报道大约20％～30％的1型或2型糖尿病患者发生糖尿病肾病，其中一部分进展为终末期肾病。如未进行特别干预，在有持续性微量白蛋白尿的1型糖尿病患者中约80％的人于10～15年内发展为临床肾病。此时可出现高血压。一旦临床肾病发生，如不进行有效干预，几年之内肾小球滤过率逐渐下降，10年后50％，20年后75％以上的患者将发展为终末期肾病。DN具有特殊的结构及功能异常，如：高滤过、肾脏及肾小球肥大、系膜基质积聚、肾小球基底膜增厚等。探讨DN发病机制的理论多围绕这些结构及功能异常而进行研究。越来越多的动物实验及细胞培养旨在寻找导致这些结构及功能异常的因素。研究证实细胞因子在DN的发病中起重要作用；如内皮素-1。同时蛋白激酶C(PKC)对糖尿病各种并发症的发生起着关键性作用，特别是在糖尿病早期，对肾脏血流及血管动力学有明显影响。本研究用链脲佐菌素诱发、建立糖尿病大鼠模型，观察“加味当归芍药散方”及血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotensin receptor antagonist,ACEr)“卡托普利”对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用并探讨其作用机制，为糖尿病肾病的防治开辟新途径。
方法：成年雄性Wister大鼠48只，随机分为四组，分别为正常对照组(CON)，糖尿病未治疗模型组(DM)、糖尿病卡托普利西药组(ACEI),糖尿病加味当归芍药散方中药组(CPA)。造模组大鼠于空腹状态一次性尾静脉注射链脲佐菌素(streptozocin，STZ)60mg/kg，诱发糖尿病模型，第7天尾部取血测血糖值，选取血糖值>11.1mmol/L的大鼠为糖尿病大鼠。CPA给予相当于生药13.2g/kg/d的浓缩药液灌胃，ACEI组给予7.13mg/kg/d灌胃，CON及DM组按等量生理盐水灌胃。4周后，测定每只大鼠体重，留取24小时尿液，非麻醉处死大鼠，测定血糖(FBG)、肾指数、内生肌酐清除率(Ccr)、24小时尿微量白蛋白(UALB)、β2-微球蛋白(Uβ<,2>-MG)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及肾组织中蛋白激酶Cα(PKCα)和内皮素1(ET-1)的表达。留取肾皮质标本进行光镜观察、拍照，利用病理图像分析系统测定PKCα和ET-1在肾小球的平均光密度值。
结果：1对肾重体重比的影响：与CON组比较，糖尿病动物肾重体重比显著上升，尤其是DM组，差异有统计学意义(P<0.01)；而药物治疗的ACEI、CPA组肾重体重比显著小于DM组，差异均有统计学意义(P<0.01)2对血糖的影响：与正常组比，模型组、中药组、西药组开始血糖水平显著高于正常组(P<0.01)，说明链脲佐菌素造糖尿病模型成功。与模型组比，加味当归芍药散方可降低给药后第四周血糖值(P<0.05)，对第二周血糖值无明显影响(P>0.05)。
3 对早期肾损伤各实验室指标的影响：与上下常组比，模型组尿微量白蛋白、内生肌酐清除率、β<,2>-微球蛋白显著升高。与模型组比，加味当归芍药散方可显著降低尿微量白蛋白、β<,2>-微球蛋白(P<0.01)，明显减低内生肌酐清除率(P<0.05)；西药组显著减低尿微量白蛋白、β<,2>-微球蛋白(P<0.01)，对Ccr无明显影响(P>0.05)。
4 对胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的影响：与正常组比较，糖尿病模型组和西药组胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白显著升高(P<0.01)；而中药组可显著降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平，与正常组无显著性差异(P>0.05)；与模型组比较，中药组各指标显著降低(P<0.01)；西药组各血脂指标无显著性差异(P>0.05)。
5 对内皮素-1表达的影响：与正常组比，模型组表达显著升高(P<0.01)；与模型组比较，加味当归芍药散方组可显著降低阳性区百分比、阳性区平均积分光密度(P<0.01)，明显降低平均积分光密度(P<0.05)；卡托普利组可显著降低平均积分光密度、阳性区平均积分光密度(P<0.01)，明显降低阳性区百分比(P<0.05)。
6 对PKCα表达的影响：与正常组比，模型组表达显著升高(P<0.01)；与模型组比较，加味当归芍药散方组可显著降低阳性区百分比、平均积分光密度、阳性区平均分光密度(P<0.01)，卡托普利组可显著降低阳性区百分比、平均积分光密度(P<0.01)，明显降低阳性平均积分光密度(P<0.05)。
7病理：肾小球毛细血管基底膜厚度：所有糖尿病组均大于CON组，药物治疗组显著低于DM组。
结论：四周后，STZ诱导的大鼠肾脏出现结构和功能损伤，“加味当归芍药散方”可改善糖尿病早期肾损伤程度。具有轻度降糖作用，减少尿微量白蛋白排出、降低内生肌酐清除率、降低胆固醇、甘油三酯、减少PKCα、ET-1在肾组织的表达、延缓肾小球毛细血管基底膜增厚的作用；调理气血、活血利水方药“加味当归芍药散方”防治DN的机理可能与调节血脂代谢紊乱，减少尿微量蛋白，降低PKCα、ET-1在肾组织的表达、改善DN肾脏微循环，降低肾小球内压力，改善肾小球高滤过，保护肾功能，改善系膜基质增生及肾小球毛细血管墓底膜增厚，减少肾小球细胞外基质的沉积等有关。“加味当归芍药散方”防治DN的作用与其抑制肾脏ET-1、PKCα表达等因素有关。其深层作用机制，有待于今后进一步研究。