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目的通过本实验,观察电针和艾灸联合运用对阿尔茨海默病模型大鼠行为学以及海马CA1区细胞周期调节因子cyclinE、p21/cip的影响,探讨电针加艾灸改善AD模型大鼠的学习记忆能力和影响神经细胞凋亡的机制。以期进一步揭示中医针灸治疗AD的作用机理,并为针灸在临床上更好地防治AD提供实验依据。方法将雄性wistar大鼠90只进行Y型水迷宫测试(即将反应过于灵敏和过于迟钝的大鼠剔除),经筛选出的标准大鼠再随机分成4个组:正常组、假手术组、模型组、电针加艾灸组(以下简称治疗组),每组20只。用微量注射器从双侧海马CA1区注入A β1-42寡聚体制作AD大鼠模型。造模成功后,治疗组先用电针刺激再用艾条温和灸大鼠的“百会”、“肾俞”穴,治疗完成后的第二天即开始进行Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)定位航行实验和空间探索实验,实验共历时5天,实验结束当天即取材,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测大鼠海马区cyclinE、p21/cip含量的变化。用SPSS Statistics17.0统计软件进行数据统计分析。结果1.行为学检测结果:经过定位航行实验和空间探索实验的测试,正常组与假手术组相比,大鼠的逃避潜伏期、跨越原平台的次数和在原平台停留的时间均无明显差异(P>0.05);与模型组比较,正常组、假手术组和治疗组都存在显著性差异(P<0.05),治疗组的行为学检测明显优于模型组(P<0.05);与治疗组比较,正常组和假手术组有显著差异性(P<0.05)。2.免疫组化结果表明:正常组与假手术组相比,cyclinE和p21/cip的表达均不存在显著差异性(P>0.05);与模型组比较,正常组、假手术组和治疗组大鼠海马区的cyclinE和p21/cip表达量均存在显著性差异(P<0.05),其中,模型组大鼠cyclinE的阳性细胞个数明显多于其他三组。而p21/cip的阳性细胞个数明显少于其他三组(P<0.05);与治疗组比较,正常组和假手术组p21/cip的阳性细胞数有显著差异性(P<0.05)。3.免疫印迹结果表明:治疗组大鼠海马CA1区cyclinE表达量高于正常组和假手术组(P<0.05),且治疗组明显低于模型组(P<0.05); p21/cip在模型组的表达明显少于正常组和假手术组(P<0.05),而治疗组明显多于模型组(P<0.05)。结论1.因为AD的根本病机是肾虚髓空、神机失用,故本研究选用百会和肾俞穴进行艾灸和电针刺激,可以达到益肾填髓、聪脑益智的治疗目的。2.通过电针和艾灸的联合治疗能有效提高AD模型大鼠的学习和记忆功能,减轻其不断退化的记忆和认知功能所造成的症状,从而延缓衰老的进程。3.电针加艾灸能明显降低AD模型大鼠海马CA1区cyclinE的过度表达,增加p21/cip的表达量,从而调控细胞的分裂周期,减少神经元的凋亡。4.针灸治疗阿尔茨海默病的作用机制可能是通过调节神经细胞周期相关蛋白实现的,其中正控蛋白cyclinE以及负控蛋白p21/cip可能起到关键作用。