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第一部分TCDD诱导胎鼠腭裂过程中组蛋白H4乙酰化的表达目的:研究由环境污染物2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导胎鼠腭裂发生过程中,组蛋白H4乙酰化在腭突中的表达,探讨组蛋白H4乙酰化在胎鼠腭裂发生中的可能机制。方法:48只C57BL/6J近交系孕鼠完全随机分为实验组和对照组,小鼠孕10.5天(gestation day,GD10.5)时,一次性给予孕鼠分别灌服20ug/kg TCDD(实验组)和等剂量玉米油(对照组),分别在GD13.5、GD14.5、GD15.5剖腹取胎鼠头部标本,作冠状位组织切片,采用免疫组织化学染色观察组蛋白H4乙酰化在腭突中的表达,Western Blot检测胎鼠腭组织组蛋白H4乙酰化的相对表达量。结果:TCDD组24只孕鼠获得活胎160只,活胎腭裂发生率为100%;对照组24只孕鼠获得活胎178只,活胎腭裂发生率为0。TCDD组24只孕鼠获得活胎160只,死胎和吸收胎12只,活胎腭裂发生率为100%,均为完全腭裂组蛋白H4乙酰化主要表达在腭突上皮细胞中,间质细胞少许表达;在腭发育各个主要时期GD13.5、GD14.5、GD15.5腭突上皮细胞的相对表达量分别是:对照组为0.60±0.25,0.92±0.09and 0.90±0.09;TCDD组为1.02±0.28,1.61±0.27 and 1.28±0.13,对照组与实验组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TCDD诱导的C57BL/6J胎鼠腭裂的发生可能与组蛋白H4乙酰化修饰有关。GD13.5~GD15.5腭突组织中组蛋白H4乙酰化水平显著升高可能是TCDD致胎鼠腭发育障碍的表观遗传机制之一。第二部分TCDD诱导胎鼠腭裂过程中TβRs基因变化的实验研究目的:探讨TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲ基因变化与TCDD所致胎鼠腭发育障碍的相关性。方法:取24只C57BL/6J孕鼠随机分为TCDD组和对照组,每组再根据怀孕天数分成三个亚组,每组4只孕鼠。同样一次性在GD10.5分别灌胃20μg/kg TCDD(TCDD组)和等量玉米油(对照组)。在GD13.5、GD14.5和GD15.5分别剖腹孕鼠取各组胎鼠腭组织,提取总RNA,逆转录成c DNA,利用Q-PCR技术检测各组胎鼠腭组织中TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲm RNA表达变化情况。结果:TCDD组12只孕鼠活胎数为82只,活胎发生腭裂为100%;对照组12只孕鼠获得98只活胎,无腭裂畸形发生。对照组TβR-Ⅰm RNA相对表达量在GD13.5、GD14.5和GD15.5分别为2.06±0.21、1.38±0.12和0.78±0.17,TCDD组分别为0.98±0.26、0.75±0.14和1.22±0.05;对照组TβR-Ⅱm RNA相对表达量在GD13.5~GD15.5分别为1.84±0.08、1.14±0.09、0.81±0.13,TCDD组分别为0.91±0.22、0.96±0.06、1.30±0.13;TβR-Ⅲm RNA在对照组的相对表达量各自为1.86±0.10、1.11±0.11、0.67±0.15,在TCDD组分别为0.85±0.05、0.93±0.09、1.17±0.16。TCDD组的TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲm RNA在GD13.5和GD14.5相对表达量均低于对照组,差异有统计学意义(p<0.05);而在GD15.5,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲm RNA高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:TCDD诱导的胎鼠在腭发育关键时期GD13.5与GD14.4,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲm RNA呈低表达状态,而在GD15.5呈高表达。TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及TβR-Ⅲm RNA的低表达很可能参与了环境因素诱发胎鼠腭裂融合障碍过程。