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目的:近视就是眼在调节放松的情况下,远处的平行光线经过眼的屈光系统后,聚焦在视网膜前,从而造成视物模糊的一种屈光不正。近视发病率在人群中呈上升趋势。影响近视发生发展的因素有遗传和环境两大因素,但其具体发病机制至今没有明确,更没有确切有效的治疗方法。研究表明腺苷A2A受体通过调控眼巩膜胶原的合成及细胞外基质的产生参与了眼的生长发育和近视的形成。亦有研究发现腺苷非选择性拮抗剂7-甲基黄嘌呤(7-MX)能延缓近视进展。本实验使用腺苷A2A受体高度选择性拮抗剂伊曲茶碱(Istradefylline,KW6002)来研究腺苷A2A受体在小鼠正常屈光发育和形觉剥夺性近视中所起的作用,为可能的临床治疗近视提供新的作用靶点。 方法:选取3周龄野生型C57BL/6小鼠,随机分成正常屈光发育以及形觉剥夺性近视两大组,前者饲养在正常的光照等环境中,形觉剥夺性近视组给予持续的单眼形觉剥夺。正常组随机分成空白对照组(Normal)、溶剂组(Vehicle)、低剂量药物组(KW6002-0.33或KW-0.33)、高剂量药物组(KW6002-3.3或KW-3.3);剥夺组又随机分成单纯形觉剥夺组(FD-Only)、形觉剥夺加溶剂组(FD-Vehicle)、形觉剥夺加低剂量药物组(FD-KW6002-0.33或FD-KW-0.33)、形觉剥夺加高剂量药物组(FD-KW6002-3.3或FD-KW-3.3)。实验所使用的药物及剂量为:低剂量(0.33mg/kg)以及高剂量(3.3mg/kg)的A2A受体拮抗剂伊曲茶碱(Istradefylline或KW6002),溶剂为15%二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)和15%蓖麻油(Castor Oil)和70%的水的乳浊液。每日腹腔注射给药,连续给药1周、2周和4周。实验第2周行单眼视网膜电图(electroretinogram,ERG),以明确药物是否到达视网膜以及检测视网膜功能。在实验前和实验1、2、4周后,分别测量小鼠屈光度和眼轴长度等生物学参数,并进行比较。 结果:A2A受体拮抗剂伊曲茶碱能使小鼠正常的屈光发育向远视方向偏移,且眼轴长度跟溶剂组相比是缩短的,并且呈剂量依赖性。如实验4周后KW6002-0.33组小鼠左右眼屈光度数值和眼轴长度值分别为6.64±2.00D,6.33±2.08D和2.772±0.008mm,2.722±0.009mm; KW6002-3.3组小鼠左右眼屈光度数值分别为9.60±1.53D和9.87±1.52D,相应的左右眼眼轴长度分别为2.725±0.006mm和2.725±0.006mm;而对应的Vehicle组小鼠左右眼屈光度为3.78±1.49D和4.24±1.86D,眼轴长度分别2.746±0.006mm和2.746±0.004mm。对于形觉剥夺性近视小鼠,0.33mg/kg/day低剂量和3.3mg/kg/day的高剂量伊曲茶碱均可抑制形觉剥夺性近视,表现为两眼屈光不正差值和眼轴长度差值的减少,并且随着剥夺时间延长,药物作用效果减弱。如,实验1周后FD-Vehicle组小鼠因单纯右眼剥夺而导致的右眼与左眼的屈光度差值为-7.08±0.85D,眼轴长度差值为0.022±0.006mm;而使用伊曲茶碱后,这种差值缩小了,如FD-KW6002-0.33组小鼠屈光度差值为-2.48±0.98D,眼轴长度差值为-0.0027±0.007mm; FD-KW6002-3.3组小鼠屈光度差值为-2.00±0.77D,眼轴长度差值为-0.0005±0.007mm。实验2周后FD-Vehicle组小鼠光度差值为-7.30±0.88D,眼轴长度差值为0.03±0.006mm,FD-KW6002-0.33组小鼠屈光度差值为-2.92±0.73D,眼轴长度差值为-0.009±0.012mm; FD-KW6002-3.3组小鼠屈光度差值为-3.10±0.87D,眼轴长度差值为-0.011±0.010mm。实验4周后,FD-Vehicle组小鼠光度差值为-8.16±0.99D,眼轴长度差值为0.025±0.005mm,FD-KW6002-0.33组小鼠屈光度差值为-5.34±0.87D,眼轴长度差值为-0.006±0.007mm;FD-KW6002-3.3组小鼠屈光度差值为-5.20±0.93D,眼轴长度差值为0.004±0.006mm。ERG结果提示伊曲茶碱能降低正常屈光发育小鼠电生理暗视觉和明视觉的a波和b波振幅。但对剥夺小鼠的电生理作用不明显。 结论:⑴腺苷A2A受体拮抗剂伊曲茶碱能使正常小鼠屈光向远视方向偏移并延缓眼轴生长;能抑制小鼠形觉剥夺性近视并延缓眼轴延长。⑵伊曲茶碱对屈光的作用可能是通过改变眼轴长度实现的。⑶通过注射药物来拮抗受体和全身敲除受体是不一样的模型。⑷腺苷A2A受体有望成为临床治疗近视的新靶点。