健康三益菌对不同环境下肉鸡生产性能和脂质代谢影响的研究

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益生菌作为一种新兴的饲料添加剂,具有改善生产性能、提高肉质品质和缓解热应激等作用,其安全性极高且无残留,所以在禁抗的大环境下益生菌在家禽生产中得到了广泛的应用,但其在肉鸡饲料中的添加配比及作用机制尚需进一步探索。(1)健康三益菌对适温饲养条件下肉鸡生产性能的影响。选取700只1日龄AA肉鸡(公母各半)随机分为7组,每组5个重复,每个重复20只,适宜温度饲养,对照组饲喂基础日粮,益生菌组分别在1日龄起添加1 g/kg(PⅠ组)、5 g/kg(PⅡ组)和10g/kg(PⅢ组)健康三益菌以及7日龄起添加1 g/kg(PⅣ组)、5 g/kg(PⅤ组)和10 g/kg(PⅥ组)健康三益菌。在21 d和42 d时,测定生长性能、屠宰性能、肉质品质和血脂指标,并用qRT-PCR技术分析免疫和肠道屏障相关基因表达量的变化。结果表明,在21d时,与对照组相比,益生菌组肉鸡的平均日增重显著增加(P<0.05),PⅤ组和PⅥ组的胸肌率显著增加(P<0.05);PⅥ组的屠宰率显著大于PⅡ组(P<0.05);PⅥ组中HDL-C的含量增加但差异不显著(P﹥0.05),TLR2、TLR4、IL-1β和IL-2的mRNA相对表达量显著增加(P<0.05)。在42 d时,较对照组而言,PⅡ组、PⅢ组、PⅤ组和PⅥ组的平均日增重显著增加(P<0.05);除PⅢ组外的益生菌组TLR2、TLR4、IL-1β和IL-2的mRNA相对表达量均降低(P<0.05)。在整个试验中(1~42 d),PⅡ组、PⅢ组、PⅤ组和PⅥ组肉鸡42 d时的体重与对照组相比显著增加(P<0.05),PⅥ组Claudin、Occludin、MUC2和ZO-1 mRNA的相对表达量较对照组显著增加(P<0.05)。综合以上试验发现,7日龄起添加10 g/kg健康三益菌对AA肉鸡的促生长效果较好。(2)健康三益菌对热应激状态下肉鸡生产性能的影响。试验设计同试验一,1 d~27 d适宜温度饲养,28 d~42 d高温饲养(9:00-17:00,30℃~32℃;17:00-9:00,20℃~21℃)。在42 d时测定与试验一相同的各项指标以及热休克蛋白相关基因表达量的变化。结果表明,与对照组相比,HPⅥ组肉鸡的平均日增重以及肠道屏障相关指标(Claudin、Occludin、MUC2和ZO-1)的相对表达量均显著增加,腹脂率显著降低(P<0.05);HPⅤ组和HPⅥ组的胸肌率以及免疫相关指标(TLR2、TLR4、IL-1β和IL-2)显著提高(P<0.05);HPⅠ组的热休克蛋白相关基因(HSP70、HSP90、HSF1和HSF3)mRNA表达量水平显著下降(P<0.05)。综合来看,7日龄开始添加健康三益菌对于缓解热应激造成的机体损伤效果较好。(3)基于转录组技术研究健康三益菌对不同环境下肉鸡脂质代谢的影响。分别在C组、PⅥ组、HC组和HPⅥ组中随机抽取4个42 d肉鸡盲肠样本进行转录组测序,并进行加权基因共表达网络分析(WGCNA)。结果表明,C组和PⅥ组比较共筛选出184个差异表达基因,上调基因130个,下调基因54个。GO富集和KEGG富集发现,甘油三酯的内稳态和酰基甘油的内稳态等条目,PPAR信号通路、胰液分泌、胆汁分泌、鞘糖脂生物合成、脂肪的消化与吸收和甘油磷脂代谢等信号通路以及FABP2、FABP4、LPL、LDLR、PLA2G12B、RBP7和PPARA等差异表达基因可能与健康三益菌调控肉鸡的脂质代谢有关。HC组和HPⅥ组比较共筛选出289个DEGs,上调基因120个,下调基因169个。KEGG富集分析发现,磷脂酶D信号通路在健康三益菌调控热应激环境下肉鸡的脂质代谢中起作用,且富集到相关差异表达基因包括DDIT4、MYL9、SIRT5、ADIPOQ、SLCO4A1、ANGPTL5、ANGPTL2、ANGPTL1、LIPG、LRP2BP、CDKN1A、FABP1和LHFPL5。利用WGCNA技术筛选到了lightgreen、pink、salmon和cyan 4个脂质代谢相关模块,模块内的基因主要富集在胆固醇代谢、胆汁分泌、鞘糖脂生物合成、甘露糖型O-聚糖生物合成、JAK-STAT信号通路、钙信号通路、cAMP信号通路、丙酸代谢、脂肪酸生物合成和胰高血糖素信号通路等KEGG通路,MYL10、MPL、MYOZ2、PEX5L、NPPA和NKX2-1等可能是肉鸡调控脂质代谢的关键基因。综上所述,健康三益菌可提高不同环境下肉鸡的生产性能,改善肉质品质和脂质代谢,增强肠道屏障和免疫功能,并能够缓解高温导致的应激反应,且当7日龄开始添加10 g/kg健康三益菌时效果较佳。
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