【摘 要】
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目的：探讨热休克非小细胞肺癌患者(NSCLC)肿瘤细胞裂解物(hTCL)冲击的异体外周血来源的树突状细胞(Allo-DCs),体外诱导特异性T淋巴细胞从而产生特异性抗肿瘤免疫效应。方法：从
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目的：探讨热休克非小细胞肺癌患者(NSCLC)肿瘤细胞裂解物(hTCL)冲击的异体外周血来源的树突状细胞(Allo-DCs),体外诱导特异性T淋巴细胞从而产生特异性抗肿瘤免疫效应。方法：从手术切除的肺癌患者瘤组织制备热休克瘤细胞的裂解物(hTCL)作为肿瘤相关抗原,藉western-blot检测hTCL可诱导HSP-70的表达。然后,应用体外刺激(IVS)淋巴细胞的培养术,将hTCL冲击的无关供者外周血单核细胞衍生的DCs(AllO-MoDCs)与患者自体富集白细胞的外周血(PBMCs)混合,在体外适宜的培养条件下进行培养。最后,藉FACS, IFN-γ酶联免疫斑点试验(IFN-γElispot)、Elisa及乳酸脱氢酶(LDH)释放试验以评价收获细胞的抗肺癌免疫效应。结果：人原代肺肿瘤细胞体外热休克可诱导HSP-70的表达,应用富含hsp70的hTCL冲击异体DCs可增加其细胞表面共刺激分子表达和分泌IL-12p70。hTCL冲击异体供者的DCs作免疫原和患者自体PBMCs在体外适宜的条件下进行培养,能够促进自体PBMCs大量增殖并明显增加Thl相关细胞因子的分泌(IFN-γ分泌水平增加明显),8天后收获的活细胞,包括T淋巴细胞(CD8+/CD4+)和NK细胞,它们能对供免疫原的原代瘤细胞反应释放IFN-γ及杀伤A549瘤细胞。结论：人肺癌热休克的瘤细胞裂解物冲击的异体DCs,作为免疫原,体外和患者自体外周血PBMCs混合培养能够刺激和扩增肺癌反应性的T细胞,在临床应用中有望成为一种高效的瘤苗。
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