鸭STING基因鉴定及其在Ⅰ型干扰素通路中功能初探

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangying428
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
STING(Stimulator of Interferon Genes)是新发现的一个天然免疫相关分子,哺乳动物和鸡细胞中已有的研究表明,STING在RIG-I样受体(RLR)介导的I型干扰素信号通路中处于枢纽位置。在鸭细胞中,已确定RLR在RNA病毒识别与干扰素的诱导中发挥重要作用,然而,作为RLR通路的枢纽分子STING基因,其在鸭细胞中是否存以及其在干扰素诱导中的具体作用,尚无任何相关研究。通过反转录PCR(RT-PCR)获取了鸭STING(DuSTING)基因,DuSTING cDNA开放阅读框全长1149 bp,编码382个氨基酸。氨基酸序列分析发现,DuSTING与人、鼠、猪等哺乳动物STING同源性较低,仅为44.4%、41.4%和45.1%,与同为禽类的鸡的STING序列同源性也仅为70.6%。使用SMART和NCBI数据库结构预测及生物信息学分析发现,DuSTING包括N端跨膜区和C端的信号转导有关的功能区。成功建立了基于双荧光素酶报告基因的鸭IFN-β激活检测方法,和基于荧光定量PCR(qRT-PCR)的DuSTING的mRNA检测方法。使用所建立的qRT-PCR检测方法,对DuSTING组织分布研究发现,DuSTING mRNA分布具有不同于鸡STING的组织分布特征。通过荧光素酶双报告基因系统检测发现,DuSTING在DEF细胞中过表达,能够强烈的激活IFN-β信号通路。功能域删除研究发现,DuSTING的N端跨膜结构域删除(85-382 AA、117-382 AA、149-382 AA)能够消除其IFN-β诱导功能。此外,DuSTING C端末的32个氨基酸的删除导致DuSTING功能完全丧失。TCID50检测发现,DuSTING的在DF-1细胞中过表达能够显著抑制禽流感病毒(AIV)H9N2 SH010复制。通过qRT-PCR分析发现,感染了AIV H9N2 SH010和新城疫病毒(NDV)LaSota的DEF细胞中,DuSTING和IFN-β的表达均上调。综上,本文首次克隆了DuSTING基因,并确定DuSTING参与到了鸭I型干扰素信号通路的激活,同时,初步确定DuSTING在抗RNA病毒先天性免疫反应中发挥作用。
其他文献
张载哲学思想的目的就是立天人之大本。对张载虚气思想的理解,关键还在于对张载本然思想的理解。这种本体思想周而复始,流行不殆,推行变化,生生不息。张载的本体思想中也具有这种流动性,无论是“气”还是“太虚”,都具有“生生不息”的特点,同时兼具超越性。随着西方哲学思想传入对中国哲学思想的冲击。学者多以本体论和宇宙论来解释张载的太虚即气命题,与此同时,对太虚即气中即字的解释为是还是不即不离,各持一端自然纷争
近年来,全球石油资源随着开采量的增加而逐渐减少。中俄境内很多油田进入开发中后期,开发难度也与日俱增,虽然中俄两国采取了诸多技术措施优化采油设备,但机械采油法仍占主导
随着集成电路工艺技术的迅速发展,MOSFET器件的特征尺寸逐渐缩小且越来越接近物理极限,此时短沟道效应的出现对传统MOSFET器件的性能造成了严重影响。通过理论和实验研究发现,利用尺寸缩小使得器件性能提升的方法变得越来越困难,并同时面临严重的功耗问题。为解决这些问题,一种基于带带隧穿(BTBT)机理的场效应器件隧穿场效应晶体管(TFET)被提出。TFET不仅可以有效抑制短沟道效应,还能突破传统MO
当今我国工业生产、百姓生活等高度依赖石油天然气资源,石油天然气的消耗量日益增加。然而石油天然气为不可再生资源,目前资源产量正逐年递减。而且我国的低渗透油气田较多,
自从我国新课程教学实施以来,高中阶段的历史教学理念发生了巨大的变化:历史的教学理念主要在于教育树人,利用过去我国惨痛的经历教育新一代中国人吸取教训,更好地为我国努力
<正>"一年好景君须记,正是橙黄橘绿时"、"桃红李白皆夸好,须得垂杨相发挥"、"疏影横斜水清浅,暗香浮动月黄昏"。花卉,以艳丽夺目的色彩,千姿百态的花形,葱翠浓郁的叶片,秀丽
国内主流功率(300 MW以上)汽轮机在做气密性实验时,行业标准要求使用产品螺栓进行热紧。经对近几年实际情况统计发现,热紧后的螺栓频繁发生与螺孔和罩螺母咬死的情况,咬死率
共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一种天然不饱和脂肪酸,羧基与共轭双键的存在赋予其pH响应性及自交联活性。纳米颗粒由于表面特殊的物理和化学性质受到研究者的青
酸奶饮料是以鲜牛奶为主要原料,经乳酸菌发酵后,调制加工而成的一类营养保健饮料,其营养丰富,含有促进人体生长发育和维持健康水平的某些必需物质,而且具有较为显著的保健医
郭象对"逍遥"理解为对于"己性"的满足,即是"有待"逍遥。但是这种"有待"逍遥明显与庄子本意不同。支遁的"逍遥"义已经略近庄子。经过梳理庄子文本,及参照郭象注、成玄英疏后,