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CTLA-4由237个氨基酸组成，是Ⅰ型跨膜糖蛋白，其单体的相对分子量约为43KD，CTLA-4在细胞表面主要以二聚体形式存在。激活的T细胞高表达CTLA-4，与CD28竞争性结合B7分子，继而抑制T细胞活化。而CTLA-4 mAb可以阻止CTLA-4与其天然配体的结合，从而阻断CTLA-4对T细胞负调节信号的传导，增强T细胞对各种抗原的反应性，发展CTLA-4抗体用于肿瘤的免疫治疗是目前肿瘤基因治疗的热点。
鼠源CTLA-4单克隆抗体进入人体后可能诱发人抗鼠抗体免疫应答(HAMA)，因此我们拟制备新型抗CTLA-4人鼠嵌合抗体，以降低其免疫原性，提高其在临床使用中的安全性。
我们首先构建了人CTLA-4胞外区蛋白表达载体sCTLA-4-pet22b+，并在Escherichia coli．中以包涵体的形式表达出目的蛋白。在稀释复性得到sCTLA-4的二聚体后，经过DEAE阴离子交换柱和G75分子筛纯化后得到高纯度的目的蛋白。通过免疫小鼠，细胞融合，以及有限稀释法筛选，获得两株高亲和力的小鼠抗人CTLA-4单克隆抗体22G11，16C11。利用试剂盒检测其亚型分别为(IgG1，κ)、(IgG2a，κ)。流式细胞术的结果表明，与商品化的CTLA-4单抗对照一样，两株抗体都能与表达CTLA-4抗原的Jurkat细胞特异性结合。Western blotting分析进一步证实它们特异性识别CTLA-4分子。
我们采用5’RACE技术获得了22G11，16C11的可变区全长cDNA，将可变区基因序列输入计算机在GenBank数据库中检索，证明是新克隆的抗体基因。
在获得22G11，16C11这两株单抗的可变区基因之后，我们将它们分别与人源抗体的恒定区连接，组成嵌合抗体，然后将嵌合抗体轻、重链基因分别克隆到真核表达载体。最后将嵌合抗体轻、重链表达载体共转染CHO-K1细胞，经选择培养基筛选后获得稳定表达抗体蛋白的CHO细胞株。获得的CHO细胞培养上清经Protein A亲和层析分离纯化，获得纯度在90％以上的CTLA-4嵌合抗体c22G11c16C11；抗原结合活性结果表明两株嵌合抗体都能很好地与Jurkat细胞结合；竞争抑制实验结果表明它们都能与各自对应的鼠源抗体竞争，而且它们的IC50值相似，说明两株嵌合抗体都保留了与各自对应的鼠源抗体相似的亲和力和特异性。