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目的:一氧化氮(NO)是广泛分布于体内的信号传递分子,具有多种生物学效应。NO所涉及的领域极广泛,包括血管调节、舒张支气管、神经介质、机体防御、抑制血小板、细胞毒性作用等,正日益引起人们广泛兴趣。近年来,有大量证据表明,NO在调节肺血管功能和肺部疾病中具有重要作用。对于先天性心脏病患者,尤其是合并有肺动脉高压患者的肺部病变的研究具有重要意义。现已明确体内有多种细胞均能合成NO,如血管内皮细胞,气道上皮细胞及血小板,脑细胞,噬中性粒细胞,肾上腺细胞等。NO是一种结构简单、极不稳定、有潜在毒性的可自由扩散入细胞膜的气态自由基,半衰期很短,仅3~6秒,它进入湿度较高的细支气管和肺泡后,在肺内可潴留80%并与呼吸道水分反应生成NO2-和NO3-,其部分被吸入入血后形成硝酸盐和亚硝酸盐。故NO2-和NO3-为反映NO合成的良好指标。已知的对先心病患者肺部病变研究中关于NO2-/NO3-的测定均以血清或尿液为标本,这不可避免地将受到身体其他部位所产生的NO的影响,且肺组织中从肺部血管吸收的小部分NO2-和NO3-,也不能完全反映肺组织局部NO含量的真实水平。本研究中痰液内NO2-/NO3-的含量,由肺血管内皮细胞产生并弥散入肺泡细支气管内的大部分NO2-/NO3- (小部分被吸收入血和呼出体外)及气道上皮细胞产生的NO2-/NO3-组成,更能准确地反映组织内NO含量水<WP=4>平。本课题旨在对先心病患者(分合并肺动脉高压组和未合并肺动脉高压组)术前痰液中NO2-/NO3-的测定,及其在体外循环转流(CPB)和术后经外源性NO吸入治疗后NO2-/NO3-的变化,来探讨围手术期先心病患者肺内NO代谢水平的变化及CPB、外源性NO吸入对肺血管、肺小气道的影响。方法: 研究对象:1.先天性心脏病伴肺动脉高压组(A组):22例,男13例,女9例;年龄6个月至14岁;体重5.5至31kg,平均11.9kg;其中室间隔缺损16例,动脉导管未闭1例,复合畸形5例。入选标准为术前经心脏超声、心导管检查和临床体征明确有中、重度肺动脉高压,平均肺动脉压力61mmHg。A组中随机抽取10例患者于手术后使用外源性一氧化氮吸入治疗(A1组),另12例患者使用硝普钠持续静滴治疗(A2组)。2.先天性心脏病未合并肺动脉高压组(B组):14例,男9例,女5例,年龄2至11岁;体重10.5至29kg,平均13kg;其中部分型肺静脉异位连接1例,房间隔缺损8例,室间隔缺损 5例。3.对照组(C组):10例,男7例、女3例;平均年龄3 岁;平均体重16kg;为唇、腭裂患儿。以上病例均排除左心衰竭、肺部感染、肾功能不全、原发性肺动脉高压或心源性休克等疾病。并未曾使用硝酸脂类等特殊药物。麻醉和体外循环:麻醉诱导后气管插管、机械通气、静脉复合麻醉及吸入麻醉维持。常规晶体液预充,膜肺或鼓泡式氧合器氧合。胸骨正中切口显露建立CPB,血流降温,冷晶体心停跳液灌注及心外膜置冰屑保护心肌。 实验步骤:1.A、B、C组3组患儿在麻醉后、手术前经气管插管内吸取痰液约2ml,以4倍痰液体积的木糖醇和Dubecco平衡盐溶液(1:2)稀释,置于离心机中2000<WP=5>转/分10分钟,将上清液-20oC保存。留取痰液同时抽静脉血3ml,分离血清-20oC保存。2.A、B组患儿在体外循环转机结束时,留取痰液标本和血液标本,方法同前。3.A1组于手术后经一氧化氮吸入治疗肺动脉高压,A2组采用静脉泵滴入硝普钠治疗,呼吸机治疗参数标准一致。均于用药前、用药30min后、用药2h、用药6h后留取痰液标本和血液标本,方法同前。 痰液及血清中NO2-/NO3-的测定:采用硝酸还原酶法测定样品中NO2-/NO3-的含量,具体方法参照说明书。灵敏度2μmol/L。 结果:1、手术前痰液、血清中NO2-/NO3-含量的测定结果。A组痰液中NO2-/NO3-含量为48.5±19.8μmol/L,血清中NO2-/NO3-含量为6.4±1.2μmol/L;B组痰液中NO2-/NO3-含量为69.3±23.5μmol/L,血清中NO2-/NO3-含量为8.2±1.6μmol/L;C组痰液中NO2-/NO3-含量为66.4±11.2μmol/L,血清中NO2-/NO3-含量为8.0±1.3μmol/L。三组痰液NO2-/NO3-含量不等或不全相等,差异性显著,P<0.01(F值4.8540),三组血清中NO2-/NO3-含量不等或不全相等,差异性显著,P<0.05(F值3.5872)。进一步进行q检验,痰液NO2-/NO3-含量A组较B组、C组有显著性差异,P<0.01 ,B组较C组无显著性差异,P>0.05 ;血清中NO2-/NO3-含量A组较B组、C组有显著性差异,P<0.01 ,B组较C组无显著性差异,P>0.05 。A、B、C三组痰液、血清中NO2-/NO3-含量均呈正相关,r值分别为0.5495 、0.4985、0.6581,P<0.01。 2、体外循环转机对痰液、血清中NO2-/NO3-含量的影响。体外循环转流时间60.8±23.3min,主动脉阻断时间30.1±18.4min,主动脉阻断期平均咽温30.3±1.8℃。体外循环转<WP=6>机后A组痰液中NO2-/NO3-含量35.5±6.9 μmol/L,血清中NO2-/NO3-含量4.5±0.9 μmol/L,B组痰液中NO2-/NO3-含量49.8±10.3 μmol/L,血清中NO2-/NO3-含量6.3±1.1 μmol/L,均较转机前减少,差异性显著,P<0.01。A、B组痰液、血清中NO2-/NO3-含量变化趋势一致, 呈正相关,r值分别为0.6492、0.5235,P<0.01。 3、经吸入一氧化氮和静脉泵入硝普钠后痰液、血清中NO2-/NO3-含量的变化。一氧化?