【摘 要】
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本试验通过在绵羊妊娠期饲粮中添加适宜水平亚硒酸钠,从不同角度探讨母源硒对绵羊胎盘发育的影响。选取80只体重、体型、年龄、胎次相近经同期发情人工授精的湖羊母羊作为试验动物,随机均分两组,试验组在基础饲粮中添加0.5 mg/kg DM亚硒酸钠,对照组饲喂基础饲粮。试验期为整个妊娠期（约150 d）。饲喂试验结束母羊产羔后待胎盘自然排出,立即收集脱出的胎盘进行处理并对初生羔羊称重;记录胎盘重、脐动脉分支
【基金项目】
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山西省自然科学基金项目（20210302123363,201901D111234）； 山西省“1331 工程”重点学科建设专项；
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本试验通过在绵羊妊娠期饲粮中添加适宜水平亚硒酸钠,从不同角度探讨母源硒对绵羊胎盘发育的影响。选取80只体重、体型、年龄、胎次相近经同期发情人工授精的湖羊母羊作为试验动物,随机均分两组,试验组在基础饲粮中添加0.5 mg/kg DM亚硒酸钠,对照组饲喂基础饲粮。试验期为整个妊娠期（约150 d）。饲喂试验结束母羊产羔后待胎盘自然排出,立即收集脱出的胎盘进行处理并对初生羔羊称重;记录胎盘重、脐动脉分支数和脐静脉分支数;将子叶分离,统计子叶数和子叶总重;选取双羔母羊中等大小子叶,通过HE染色记录滋养层细胞数,检测子叶的抗氧化能力,并通过荧光定量PCR和Western blot检测子叶中胎盘发育相关基因和蛋白的表达量并对部分蛋白进行定位分析。主要试验结果如下:（1）硒处理组母体妊娠后期（120 d）全血和胎盘组织中的硒浓度显著高于对照组（P＜0.05）,并且硒处理组的胎盘重、脐动脉分支数和脐静脉分支数、子叶数和子叶总重均显著高于对照组（P＜0.05）。HE染色结果表明,绵羊妊娠期饲粮中添加0.5 mg/kg DM亚硒酸钠能够显著增加子叶中的滋养层细胞数（P＜0.05）。初生羔羊称重结果表明,硒处理组的羔羊窝重和羔羊均重显著高于对照组（P＜0.05）。（2）子叶中MDA含量、GSH-Px、SOD、T-AOC和CAT的结果表明,硒处理组中子叶MDA含量显著低于对照组（P＜0.05）,GSH-Px、SOD、T-AOC和CAT相较对照组显著提高（P＜0.05）。实时荧光定量PCR和Western blot技术检测Nrf 2信号通路相关基因和蛋白的表达量。结果表明,硒处理组Nrf 2、NQO 1和HO-1基因以及蛋白的表达水平显著提高（P＜0.05）,Keap 1的表达量则显著降低（P＜0.05）。（3）通过qPCR和Western blot检测子叶中相关硒蛋白的表达水平。结果表明硒处理组子叶Txnrd-1、Txnrd-2、DIO-1、DIO-2、DIO-3、Gpx 6、Gpx 8、SEL K和SEL P的表达显著升高（P＜0.05）,Apo ER 2的水平则显著降低（P＜0.05）,Txnrd-1、Txnrd-2、DIO-3、SEL P和Apo ER 2蛋白的表达水平与荧光定量结果一致。免疫组化结果发现这些蛋白均定位在多核滋养层细胞中,分布于绒毛外层,并且对两组硒蛋白进行光密度分析后与荧光定量和Western blot结果相同。（4）通过qPCR和Western blot检测子叶中血管发育情况。结果表明硒处理组子叶VEGFA、PLGF、VEGFR-1、VEGFR-2在转录和翻译水平上的表达量显著高于对照组（P＜0.05）,经免疫组化定位后发现以上四个蛋白的棕黄色阳性信号在胎盘子叶中定位于血管内皮和多核滋养层细胞,分布在绒毛外层,并且光密度分析与荧光定量和蛋白结果一致。综上所述,绵羊妊娠期饲粮中添加0.5 mg/kg DM亚硒酸钠会通过更为有效的方式进入绵羊胎盘,增强胎盘抗氧化能力,维持胎盘中的氧化还原稳态,促进胎盘发育,从而促进后代发育。
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