人瘦素的基因克隆、表达及对NK细胞的免疫调控作用

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结论:1、克隆了人成熟和全长leptin基因,系列分析显示,克隆的基因序列和文献报道一致.2、构建了成熟hLep的原核表达载体,获得的高效稳定的工程菌株,表达的目的蛋白的占细胞总蛋白的40﹪以上.3、建立了rh-Lep的发酵、复性和分离纯化技术,获得的具生物活性的rh-Lep纯度达95﹪以上.为进行leptin的临床试验和生物学功能研究奠定了基础.4、构建了分泌型的rh-Lep哺乳细胞表达载体,为通过基因转染研究Leptin生物学功能和进行基因治疗研究提供的材料.5、首次发现了OB-R在NK细胞株的表达和Leptin对NK细胞株增殖、杀伤和细胞因子产生的调控作用,并对其在NK细胞活化的信号通路进行了初步探讨,为深入研究Leptin对NK细胞的免疫调控效应奠定了基础.6、制备了抗hLep的单克隆抗体,为开展Leptin的定量定性检测及其生物学功能和在自身免疫疾病发生发展中病理生理作用的研究提供了有效的手段.
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