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背景据统计全世界肺癌的发病率正以每年0.5%的速度增长,每年约有60万的新发病例。在我国,近20年来肺癌发病率以每年约11%的速度递增,20世纪90年代,总患病率达到了20.41/10万。非小细胞肺癌(non- small- cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌的75%~80%。由于NSCLC患者基于症状及病理的确诊方法对发现早期NSCLC并不十分有效,且对放化疗敏感性差,以致目前NSCLC患者的治疗效果并不理想,治疗后的NSCLC患者5年生存率仅有8%-12%左右,故临床多采用综合治疗,手术、放疗、化疗已构成目前临床治疗的三大经典模式。近年来日益受到重视的肺癌生物治疗,逐渐发展成为肺癌治疗的第四模式。分化异常和凋亡受阻是肿瘤发生发展的主要原因,诱导肿瘤细胞分化和凋亡已成为当前肿瘤治疗的热点。维甲酸诱导分化急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocyte leukemia,APL)已成为临床治疗血液系统恶性肿瘤的常规手段,维甲酸对多种实体瘤细胞均有诱导分化、抑制增殖、诱导凋亡的作用。鉴于分化诱导剂和传统的化疗药物通过不同的机制作用于肿瘤细胞,NSCLC自身存在细胞的异质性、耐药性及个体差异等因素,加之前期本实验室已进行相关研究,并从细胞形态学和细胞周期动力学发现维甲酸可诱导分化治疗晚期NSCLC患者并有提高其临床疗效的趋势,故本研究将继续拟阿维A胶囊治疗晚期非小细胞肺癌患者,并在前期研究的基础上调整治疗方案,延长随访时间,同时从细胞周期相关蛋白、肺耐药相关蛋白及肿瘤指标等不同方面进一步了解维甲酸对晚期非小细胞肺癌患者肿瘤细胞分化程度影响和临床疗效评估,为探索临床治疗肺癌的新途径提供研究依据。目的通过运用阿维A胶囊治疗晚期非小细胞肺癌患者,了解维甲酸对肺癌细胞形态学、细胞周期血流动力学、细胞周期素D1、细胞周期抑制蛋白(pRb)、肺耐药相关蛋白LRP、外周血肿瘤标记物CEA、EGFR、CYFRA21-1、NSE等水平在治疗前后变化的影响以及临床疗效的观察。方法治疗A组和对照组采用GP、NP、DP 3种方案化疗。治疗A组(每次化疗结束后第1天)和治疗B组,给予阿维A胶囊1 mg/ ( kg·d),连续服用7天为一个疗程,间隔14天后,重复使用(与化疗同步)。治疗4个周期后进行疗效评估及毒性反应的评价。HE染色显微镜下观察治疗组病人治疗前后癌细胞形态学变化包括细胞的浆核比,细胞膜的完整性及厚度等;流式细胞术分析治疗A组和治疗B组肺恶性胸腔积液脱落细胞群体细胞周期及DNA含量变化;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测血细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期抑制蛋白(pRb)、表皮生长因子受体(EGFR)、肺耐药相关蛋白(LRP)和电化学发光免疫测定法(ECLI)测血癌胚抗原(CEA)、非小细胞相关抗原(CYFRA21-1)、神经特异烯醇化酶(NSE)等浓度水平在治疗前后的变化。结果1、阿维A胶囊序贯常规含铂方案化疗治疗四个周期,治疗A组和治疗B组肺癌细胞形态学上表现为肺癌细胞向成熟细胞方向分化:表现为细胞(相对)变扁平,细胞体积增大,核外形规整核/浆比减小;胞质密度减低,核变大,核密度亦减低,细胞间隙加宽,生长缓慢,出现极性等。2、治疗A组和治疗B组伴有恶性胸腔积液的患者,在治疗四个周期后血清中细胞周期因子CyclinD1水平较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),治疗A组和治疗B组血清中细胞周期抑制蛋白pRb水平较治疗前升高(P<0.01)。流式细胞术分析肺恶性胸水脱落细胞学,治疗A组和治疗B组治疗后G0/G1期比例升高,S期、G2/M期比例降低与治疗前相比有统计学差异(P<0.05),与对照组相比治疗后S期、G0/G1期比例升高差异有统计学意义(P<0.05)。3、血清学指标165例入组患者肿瘤标记物均高于正常水平,治疗四个周期后治疗A组、治疗B组和对照组较用药前有所降低(P<0.01),且治疗A组下降幅度较其余各组显著(P<0.01)。治疗A组和治疗B组治疗后肺耐药相关蛋白(LRP)表达水平较用药前降低,差异显著有统计学意义(P<0.01)。对照组的LRP水平较用药前明显升高(P<0.01)。阿维A胶囊联合化疗序贯治疗组,患者血清肿瘤学指标及肺耐药相关蛋白(LRP)显著下降比单纯化疗组效果好,说明维甲酸有降低肺癌细胞恶性程度、增加化疗药物敏感性的作用。4、临床疗效及预后治疗A组临床有效率(CR+PR)%和疾病控制率(CR+PR+SD)%分别为57.33%,94.67%均高于治疗B组和对照组,三组临床有效率统计学有显著差异(P<0.05),三组疾病控制率统计学有显著差异(P<0.05)。用COX多因素回归模型分析影响晚期非小细胞肺癌的预后因素结果提示治疗方式可能对预后有影响,而年龄未进入COX回归模型,提示年龄对于晚期非小细胞肺癌患者的预后影响可能意义不大。5、毒副作用治疗A组和治疗B组治疗前后皮肤损害差异有统计学意义(P<0.05)。治疗A组和对照组血常规、肝肾功能均有不同程度的损害,治疗前后差异有统计学意义(P<0.05)。治疗B组治疗前后血常规、肝肾功能差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿维A胶囊联合含铂类化疗序贯治疗晚期非小细胞肺癌患者四个周期后,我们发现维甲酸有诱导肺癌细胞分化,阻滞癌细胞周期,降低肺癌细胞恶性程度以及协同提高化疗疗效的作用趋势,主要表现在用药前后细胞形态学、细胞周期动力学、细胞周期相关蛋白、肺耐药蛋白以及血肿瘤学指标等水平的变化;同时我们发现阿维A胶囊联合化疗序贯治疗组,从血肿瘤学指标、化疗耐药、临床疾病控制率等方面来观察较单纯化疗疗效有部分提高,且毒副作用轻,对提高晚期非小细胞肺癌患者临床疗效及带瘤生存期有一定的临床意义。