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兽药种类繁多,根据用途可分为促生长剂、抗生素、抗寄生虫药、镇静剂等。许多药物使用后容易在动物体内残留并最终通过食物链进入人体。人们长期摄入含有兽药残留的动物性产品可能导致中毒现象,甚至有致畸、致癌、致突变等效应,严重危害人体健康。为确保食品安全,我国农业部发布的235号公告中明确规定了动物性食品中兽药残留的限量标准,并要求β-受体激动剂类药物、人工合成激素类药物、镇静剂类药物、硝基呋喃类和硝基咪唑类抗生素等多种药物在动物源性食品中不得检出。为了满足对这些禁用药物测定的高灵敏度要求,并尽量避免假阳性结果的出现,开发具有高灵敏度和高分辨率的检测技术势在必行。本实验通过优化猪肉和猪尿两种猪样品基质中20种兽药残留的前处理方法和色谱／质谱条件,建立了一种猪肉及猪尿中20种禁用兽药的超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-Quadrupole-time of Flight Mass Spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS)高分辨筛查方法；建立了猪尿中20种禁用药物残留的高效液相色谱-电喷雾-离子漏斗-质谱／质谱(High Performance Liquid Chromatography-Electrospray Ionization-ion Funnel-Mass spectrometry/Mass Spectrometry, HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS)测定方法。本论文的主要工作如下：1.建立了一种猪肉及猪尿液中20种禁用兽药的UPLC-Q-TOF/MS检测方法。猪肉样品经0.1%乙酸乙腈提取后用HLB柱净化处理,尿液样品过HLB净化。甲醇洗脱,氮气吹干,乙腈-水(1：9,v/v)定容后过膜检测。C18色谱柱分离,质谱离子化模式为电喷雾正离子模式,先根据各化合物母离子精确质荷比得到相应的提取离子色谱图,根据提取离子流色谱图建立外标定量方法。通过碰撞诱导解离方式优化碰撞能量,得到子离子精确质荷比,进一步对目标物做定性分析。20种化合物在5～500μg/L范围内呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.99。20种化合物的检出限(Limits of Detection, LOD)为2～5μg/L,以猪肉为基质方法的定量限(Limit of Quantitative, LOQ)为5～10μg/kg,尿液基质方法的定量限为5～10μg/L分别以1、2和4倍定量限的三个添加水平做回收试验,结果表明方法平均回收率在64.1%～112.6%之间,相对标准偏差(Relative Standard Deviations, RSD)为3.0%-19.8%。应用已建立的筛查方法对北京超市及市场中4种猪肉样品进行检测,结果未发现残留有以上20种兽药的阳性样品。2.建立了一种猪尿液中20种禁用药物的HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS检测的方法。尿液样品直接经过HLB固相萃取柱净化,甲醇洗脱,氮气吹干后,乙腈-水(1：9,v/v)定容至1mL,过膜后直接分析,采用Eclipse Plus C18柱高效液相色谱分离,电喷雾正离子电离模式,采用双离子漏斗技术使离子聚焦,多反应离子监测(Multiple Reaction Monitoring, MRM)扫描,外标标准曲线法定量。结果表明3个加标浓度下,20种药物平均加标回收率为81.5%～104.8%,相对标准偏差为3.0%-16.0%,各物质的检出限为0.05～0.2gg/L,方法的定量限为0.1～0.5μg/L。本文建立的猪尿液中20种禁用兽药的HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS检测方法相对于传统检测方法大大提高了灵敏度。本研究建立的UPLC-Q-TOF/MS筛查方法定性准确、分辨率高、能够有效避免假阳性,建立的HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS定量方法具有快速、灵敏的特点。能够满足国内外关于这两种猪样品中20种禁用兽药的测定要求,为食品安全监控提供技术保障。