【摘 要】
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目的：构建重组SPAG6-PGBKT7质粒，用Yeast-2-Hybriy实验来筛选出与SPAG6有相互作用的蛋白。方法：1.在“PubMed”数据库，寻找小鼠SPAG6全长碱基序列，分析SPAG6的活性区域（CDS区）；2.以小
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目的：构建重组SPAG6-PGBKT7质粒，用Yeast-2-Hybriy实验来筛选出与SPAG6有相互作用的蛋白。方法：1.在“PubMed”数据库，寻找小鼠SPAG6全长碱基序列，分析SPAG6的活性区域（CDS区）；2.以小鼠睾丸的cDNA为模板，通过PCR技术扩增SPAG6序列；3.TA克隆；4.构建SPAG6/PGBKT7重组质粒；5.将SPAG6/PGBKT7质粒转入AH109细胞以SPAG6/PGBKT7为饵，使其与小鼠cDNA文库，进行酵母双杂交；6.提取酵母质粒；7.酵母质粒转化；8.测序后分析。结果：构建重组的SPAG6/PGBKT7质粒通过鉴定，结果正确；酵母双杂交实验，初步筛选出数个与SPAG6可能发生相互作用的蛋白。结论：有许多蛋白与SPAG6有着相互作用。为进一步研究与SPAG6发生相互作用的蛋白提供依据。
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