目的通过分析益气活血通络法对NAION患者的临床疗效,评价益气活血通络法对NAION患者视力、视野及视神经纤维层的影响。实验观察益气活血通络法在不同时间段rAION大鼠视网膜细胞超微结构、RNFL的变化,本法对rAION的视网膜神经纤维层的保护。探讨益气活血通络法治疗NAION的临床疗效和可能实验作用机制。方法1.临床研究本试验采用随机对照的临床研究,以NAION患者39例49眼为观察对象,随机分为观察组及对照组。观察组：黄芪注射液20 ml、川芎嗪注射液160 mg、醒脑静注射静脉20 ml及地塞米松10mg分别加入0.9%N.S 250 ml中静脉点滴,每日1次,2周为1个疗程。静脉点滴1～2个疗程。地塞米松3～5天后逐渐减量。同时予以益气活血通络汤随证加减,每日1剂。对照组：地塞米松10mg分别加入0.9%N.S 250 ml中静脉点滴,每日1次,静脉点滴1～2个疗程。地塞米松3～5天后逐渐减量。观察该综合疗法对NAION患者视力、视野及神经纤维层厚度的影响,通过治疗前后对照,及组间疗效的比较,探讨该综合疗法对NAION的临床疗效及可能的作用机理。2.实验研究将符合条件要求的SD大鼠共40只,随机分成4组,分别为空白对照组、模型对照组、观察组、对照组,每组10只SD大鼠。研究采用从大鼠尾静脉注入孟加拉红2.5 mmol／(mL.kg),即刻加置VLOK 90D前置镜对视盘上方2／3面积,用裂隙灯绿光(514～535 nm)进行照射,光斑直径500 um,照射时间20s,来造模。在造模成功后,观察组予以黄芪注射液1.8ml／kg、川芎嗪注射液15mg／kg以及醒脑静注射液1.8ml／kg腹腔注射,每天1次；西药对照组予以地塞米松注射1.8mg／kg腹腔注射,每天1次。通过对rAION大鼠者治疗前后进行OCT检测,以客观评价中药黄芪注射液、川芎嗪注射液及醒脑静注射液对rAION视网膜视神经纤维层改变的影响。通过对rAION治疗前后视网膜光学显微镜及电子显微镜下改变的观察,以客观评价中药黄芪注射液、川芎嗪注射液及醒脑静注射液对rAION眼底视网膜病理及超微结构的改变研究。结果1.在本组病例的临床观察中,观察组20例(26眼)患者中,治愈5眼,治愈率19.23%；显效11眼,有效8眼,无效2眼,总有效率92.31%；对照组19例(23眼)患者中,治愈2眼,治愈率8.7%；显效8眼,有效8眼,无效5眼,总有效率78.26%。两组比较,经统计学分析,观察组疗效优于对照组。2.观察组中患者经过治疗,患者视力普遍得到提高。在经过2周治疗后,观察组与对照组视野缺损对比,两组视野缺损度都有改善,两组比较,t=1.811,P>0.05,统计学分析无明显差异。在经过4周治疗后,观察组与对照组视野缺损对比,观察组好转明显,两组比较,t=2.666,P<0.05,统计学分析差异有统计学意义,说明本疗法对NAION经过4w治疗后,对视野缺损改善明显优于对照组。3.在本组临床观察的39例患者中,在治疗前及治疗后2周进行OCT检查共计15例,观察组9例12眼,对照组7例10眼。观察组与对照组经过2周治疗,患者神经纤维层水肿都有所减轻,两组比较,t=-3.978,P<0.05,统计学分析差异有统计学意义,对照组与观察组比较,神经纤维层开始萎缩、变薄。4.实验研究OCT显示：正常SD大鼠OCT扫描右眼提示鼻侧RNFL厚度79.80±6.94um,视网膜各层结构清晰；模型组造模1d后RNFL厚度为96.70±5.60 um,RNFL水肿增厚,与空白对照组经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义；模型组造模7d后RNFL厚度为88.75±7.03um,RNFL仍水肿增厚,与模型组造模1d经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义；模型组造模后14 d后RNFL厚度为67.17±5.49 um,RNFL萎缩变薄,与模型组造模1d经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。观察组7d后RNFL厚度为74.75±4.03 um,RNFL厚度接近正常SD大鼠RNFL厚度,无明显水肿,与空白对照组经统计学分析,P>0.05,差异无统计学意义；观察组14d后RNFL厚度为80.17±5.12 um,RNFL厚度接近正常SD大鼠RNFL厚度,与空白对照组经统计学分析,P>0.05,差异无统计学意义；观察组7d与14 d RNFL厚度接近,经统计学分析,P>0.05,差异无统计学意义。对照组7d后为97.50±9.06 um, RNFL仍水肿增厚,与空白对照组经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义；对照组14 d RNFL厚度为64.0±6.20 um, RNFL厚度萎缩变薄,与空白对照组经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义；对照组7d与14d RNFL厚度经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。观察组7d与对照组7 d RNFL厚度,经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义；观察组14d与对照组14 d RNFL厚度,经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。5.实验中光镜显示：正常SD大鼠视神经视网膜光学显微镜像：视网膜形态正常,结构层次清楚,内外节排列整齐规则,分界清晰,视神经纤维排列有序,视网膜色素上皮层,内、外颗粒层清晰,排列有序,神经节细胞密集,血管通畅。1周后各组rNAON视网膜光镜下的变化：模型组视网膜感光细胞外节结构紊乱、破裂,视神经纤维水肿、坏死,视网膜移位,血管闭塞；观察组视网膜外节水肿消退,排列有序,血管部分再通；对照组视网膜外节水肿、疏松,排列紊乱,空泡化,血管闭塞。2周后各组rNAON视网膜光镜下的变化：模型组视网膜神经纤维层变薄明显,仍排列不整齐,血管仍闭塞；观察组视网膜外节水肿消退,视网膜各层结构较清晰,外节稍疏松、肿胀,但较完整,具有较高密度的内节,各层表面轻微的肿胀,神经纤维层排列整齐,未见明显的色素上皮改变,血管再通；对照组视细胞外节轻度肿胀、疏松,神经节细胞轻度肿胀,见空泡化,视网膜神经纤维层进一步变薄,血管仍闭塞。6.实验中SD大鼠电镜显示：观察组1周毛细血管扩张充血,管壁较薄,神经节细胞大部分线粒体不空,偶见线粒体空泡化,细胞核无溶解,胞膜完整,细胞核致密,突触内微丝减少；对照组1周神经节细胞显示：毛细血管扩张充血,线粒体空泡样改变,细胞核溶解,内质网扩张,细胞核膜完整,轴突内微丝减少较明显。而2周后观察组神经细胞电镜显示：神经节细胞细胞核胞膜完整,胞质正常,线粒体变化不明显,线粒体少许空泡样改变,神经节细胞线粒体稍肿胀,核变化不明显,突触明显可见清晰微丝,毛细血管、神经纤维细胞清晰可见；对照组神经细胞电镜显示：神经节细胞细胞核不均匀、浓缩、凋亡,线粒体空泡,突触内微丝减少明显。观察组治疗作用突出表现在对神经细胞的视网膜突触、内节神经细胞线粒体以及毛细血管的保护作用上,其疗效可由视神经细胞突触及传导通路的连接结构敏感的反映出来,与视信号传导通路的修复密切相关。结论1临床证实本综合疗法能使急性期NAION的病情得到较快控制,临床疗效显著。2临床证实对NAION患者的视力、视野及神经纤维层有改善作用,提示益气活血通络综合疗法对NAION有保护视神经功能的作用,在临床中值得推广。3动物实验形态学证实,本综合疗法的使用,对rAION视网膜神经纤维层有保护作用,对rAION视网膜缺血损伤有明显的保护作用。4动物实验证实本综合疗法能有效地改善了眼部血液循环与灌注,增加了视神经血液供应,减轻了神经组织水肿,使受损的视神经功能得到恢复。对视网膜突触复合体、内节神经细胞线粒体以及毛细血管有保护作用。