灌注流量对低温机器灌注保存供肝的影响

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目的:本实验通过对低温缺血保存方法与低温机器灌注保存方法的比较,探讨低温机器灌注保存供肝的效果和灌注流量对低温机器灌注保存供肝的影响,为机器灌注流量的设定寻找依据。方法:雄性wistar大鼠30只,随机分成6组。A组:对照组(5只)为单纯冷藏保存组,将肝脏置入4 OC HC-A液中保存12h,保存结束后行离体鼠肝循环灌注( IPRL ),灌注液为KH液,充100%纯氧,灌注流量为0.4ml·min-1·g-1,灌注温度控制在37OC,灌注时间60min。B组:实验组1 ( 5只)将肝脏置入4 OC HC-A液中持续机器灌注保存12h,灌注流量为0.1ml·min-1·g-1,保存结束后行IPRL。C组:实验组2 ( 5只)将肝脏置入4 OC HC-A液中持续机器灌注保存12h,灌注流量为0.2ml·min-1·g-1 ,保存结束后行IPRL。D组:实验组3 ( 5只)将肝脏置入4OC HC-A液中持续机器灌注保存12h,灌注流量为0.3ml·min-1·g-1,保存结束后行IPRL。E组:实验组4 ( 5只)将肝脏置入4 OC HC-A液中持续机器灌注保存12h,灌注流量为0.4ml·min-1·g-1,保存结束后行IPRL。F组:实验组5 ( 5只)将肝脏置入4 OC HC-A液中持续机器灌注保存12h,灌注流量为0.5ml·min-1·g-1 ,保存结束后行IPRL。各组于灌注前在KH液中加入透明质酸(HA)300ng/ml,分别于再灌注10min、30min和60min采集灌注流入液2ml和灌注流出液6ml,以测定丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF-a)含量和透明质酸(HA)摄取量的变化,离体鼠肝循环再灌注结束后,取少许肝左中叶组织分别在光镜和电镜下观察肝细胞及肝窦内皮细胞的形态学改变。结果:与对照组比较,实验组1和实验组5,ALT活性和TNF-a含量,HA摄取量均无显著性差异(P>0.05)。与对照组比较,实验组2实验组3和实验组4 ALT活性和TNF-a含量均降低,HA摄取量升高。有显著性差异(P<0.05)。但实验组2、实验组3和实验组4之间均无显著性差异(P>0.05)。对照组、实验组1和实验组5肝细胞出现明显肿胀、空泡变性及点状坏死,肝窦内皮细胞肿胀、变性,肝窦结构破坏。实验组2、实验组3和实验组4肝组织病理改变都轻于以上三组。结论:1、低温机器灌注可以保护肝组织的正常功能,低温机器灌注保存比低温缺血保存有明显的优越性。2、低温机器灌注灌注流量在0.2~0.4ml·min-1·g-1,为最佳。
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