DNMT3A对猪肌内前体脂肪细胞增殖与分化的作用机制研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzh18277648
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
肌内脂肪的含量与肉的多汁性、嫩度和风味等肉品质密切相关,而肌内脂肪细胞的增殖与分化分别决定着肌内脂肪细胞数目的多少和脂滴的积累程度,并最终影响着脂肪的沉积。脂肪细胞的增殖和分化是一个高度协调的过程,这一过程不仅受大量转录因子、多种细胞因子的调控,以DNA甲基化(DNA methylation)为代表的表观遗传调控亦在其中发挥着重要的作用。DNA甲基化是指在DNMT的催化下,由SAM提供甲基(-CH3),使得DNA的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)两个相邻核苷酸的中胞嘧啶第5位碳原子被选择性地添加甲基,形成5mC的过程。作为DNMT家族中的重要一员,DNMT3A可以通过升高microRNA的启动子区域的甲基化水平来调控癌细胞的增殖过程。此外,DNMT3A会促进肥胖相关的炎症反应的发生。然而DNMT3A对肌内脂肪细胞增殖和分化的影响仍不清楚。本研究通过运用DNA甲基化抑制剂处理猪肌内前体脂肪细胞,以明确DNA甲基化是否参与猪肌内脂肪细胞的分化过程;通过构建DNMT3A过表达载体以及腺病毒包装技术,以实现在猪肌内前体脂肪细胞内过表达DNMT3A的目的;利用流式细胞术、CCK8和EdU染色检测DNMT3A对猪肌內脂肪细胞增殖的影响;结合BODIPY染色研究DNMT3A对猪肌內脂肪细胞分化的作用,同时利用Real-time qPCR和WB对增殖和分化相应的基因进行了检测,并结合重亚硫酸盐测序技术对相应的机制进行了探索。获得的主要研究结果如下:1.DNA甲基化抑制剂5-Aza-DC抑制猪肌内前体脂肪细胞的分化,并且降低PPARg启动子的甲基化。2.过表达DNMT3A基因,增加活细胞数目和处于DNA复制期的细胞数目,提高增殖标志基因cyclin B、cyclin D、PCNA的表达,降低增殖抑制因子p21的表达,促进猪肌内前体脂肪细胞的增殖,其机制与升高的p21启动子甲基化有关。3.过表达DNMT3A基因,导致PPARg启动子甲基化升高,进而引起PPARg、aP2等关键成脂基因的mRNA及蛋白的表达下调,抑制猪肌内前体脂肪细胞的分化。综上所述,DNMT3A促进猪肌内前体脂肪细胞的增殖,这与升高的p21的启动子甲基化有关;通过提高PPARg启动子的甲基化,DNMT3A抑制猪肌内脂肪细胞的成脂分化。本研究从DNA甲基化角度对猪肌内脂肪沉积的机制进行了探索,为改善肉品质提供了新的思路。
其他文献
本法主要解决周围性面瘫的急性发作者和迁延不愈者,采取口腔颊粘膜放血联合穴位注射,临床观察10例患者,7例痊愈,3例好转。本法与单纯针刺及面部皮肤放血治疗对比,具有疗程短
鲤竖鳞病的组织病理变化主要表现为溶血,水肿,变性坏死和炎症,病鱼的皮肤,鳞囊,鳍、鳃、肾、肝、脾和肠都显出不同程度的病理变化,尤其是肾,锶和皮肤更严重。
目的 研究超声诱导白血病细胞K562凋亡的影响,为超声治疗的临床应用提供实验依据。方法 以人慢性粒细胞白血病急变细胞株K562为研究对象,用频率为1.8MHz的超声波辐照白血病细胞
目的:研究P57kip2基因在人体肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)不同阶段的杂合性缺失(Loss of heterozygosity,LOH)及其mRNA和蛋白表达情况,以及三者之间的关系,以探讨HCC发生的
"一二次设备融合是输配电技术发展趋势,也是市场发展的必然结果。"中国电力科学研究院配电研究所副主任韩筛根在近日召开的"2017年中国配电技术高峰论坛"上表示。近年来,随着
报纸
为了实现电动舵机电路板小体积、低成本设计,以TMS320F28335作为主控芯片,利用其自身的捕获中断和定时中断功能,实现了电动舵机控制。首先给出电动舵机的控制策略及电机驱动
文章从质与量的辩证统一性入手,提出了盈余质量的定义及其真实性、稳定性、风险性、可持续性的内涵,并阐述了各个质量维度的评价方法和关键技术,基于模型层次分析法建立了上
在全渠道背景下探讨企业实施BOPS (buy online and pick up in store)模式的最佳市场条件,对比并分析了企业不同销售模式下的最优策略选择,探讨了企业的市场占有规模、消费者
<正> 大便中混有纯血、血水或血中带有粘液或脓液,色鲜红、暗红或呈柏油样,发病在一周以内又伴有急性症状者,皆属急性便血的范畴。凡因食入动物血,肝类、铁剂药物及口、鼻、
Wnt信号传导通路是一条广泛存在于多细胞生物体内且具有高度进化保守性的信号通路。该通路对细胞增殖、分化、凋亡、细胞极性及细胞的迁移和侵入产生影响,在多种器官的发育形