通过对早期生长应答基因2(early growth response 2,Krox20)和胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP5)在美利奴羊和本地绵羊背部皮肤组织中的定位和表达情况以及培养绵羊成纤维细胞过表达Krox20的研究,以探索Krox20与羊毛弯曲的相关性及Krox20与IGFBP5之间的调控关系。选取南非美利奴羊与本地绵羊各三只。取背部皮肤组织,采用免疫组织化学技术,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测Krox20及IGFBP5 mRNA和蛋白的表达。体外培养绵羊成纤维细胞,通过细胞转染技术,以pEGFP-N1为载体,过表达Krox20来分析其对IGFBP5的调控作用。结果显示:在美利奴羊和本地绵羊背部皮肤组织中,Krox20及IGFBP5蛋白在毛基质、内外根鞘、表皮、毛干、皮脂腺中均有较强的阳性表达,在毛乳头中表达较弱。Krox20和IGFBP5 mRNA在美利奴羊背部皮肤组织中的表达量均高于本地绵羊,且Krox20 mRNA在美利奴羊的表达量是本地绵羊的2.44倍,差异极显著(**P<0.01);IGFBP5 mRNA在美利奴羊的表达量是本地绵羊的3.76倍,差异极显著(**P<0.01)。Krox20与IGFBP5蛋白在美利奴羊的表达量均高于本地绵羊,其中Krox20蛋白在美利奴羊的表达量是本地绵羊的1.53倍,差异极显著(**P<0.01);IGFBP5蛋白在美利奴羊的表达量是本地绵羊的1.42倍,差异显著(*P<0.05)。过表达Krox20后,与pEGFP-N1空载对照组相比,Krox20与IGFBP5的mRNA和蛋白的表达量均有提高。综上表明,IGFBP5作为毛发弯曲的第一标记基因,Krox20对IGFBP5有正向调控作用,Krox20对羊毛弯曲的形成有促进作用。